抗菌多肽药物的制备方法.docx

目录抗菌多肽药物的制备方法2第一章文献综述41.1抗菌肽的分类41.2抗菌肽的性质51.2.1抗菌肽的一般理化性质51.2.2抗菌肽的生物学特性51.3抗菌肽的作用机理51.4抗菌肽的制备方法61.4.1生物材料提取法61.4.2化学合成法61.4.3基因工程法61.4.4酶解法71.5抗菌肽在各方面的应用前景及目前存在的问题71.5.1抗菌肽在医疗方面的应用71.5.2抗菌肽在食品方面的应用81.5.3抗菌肽在禽畜养殖业方面的应用81.5.5抗菌肽研究存在的问题81.6基因工程制备抗菌肽简介91.6.1抗菌肽分子设计及改造策略91.6.2目的基因的获取121.6.3制备重组抗菌肽12第二章抗菌多肽的制备工艺142.1目前抗菌多肽的生产方法142.2抗菌肽制备改造设计162.2.1抗菌肽改造的原因162.2.2抗菌肽改造的方法172.2.3抗菌肽改造的依据17图2抗菌肽的筛选182.3抗菌肽的筛选192.3.1通过生物信息学工具优化抗菌肽结构参数192.3.2抗菌肽的合成、纯化192.3.3抗菌肽的活性检测202.3.4抗菌肽的结构检测202.4宿主菌的育种车间工艺流程及主要设备222.4.1主要设备以及用途：222.4.2制备基因222.4.3构建重组表达载体232.4.4目的基因片段与载体的连接232.4.5宿主菌的制备232.4.6连接产物转入大肠杆菌242.4.7筛选242.5抗菌肽的表达、纯化及分离的工艺流程及主要设备242.5.1主要设备及其用途：242.5.2重组质粒在大肠杆菌中的表达242.5.3融合蛋白的表达及制备252.5.4抗菌肽的切割和纯化252.6抗菌肽抗菌活性的检测25第三章抗菌肽药物的前景展望26抗菌多肽药物的制备方法摘要抗菌多肽是抗生素的一种。近年来，抗生素的滥用导致抗生素的耐药性是一个急需解决的问题，而抗菌多肽药物具有抗菌谱广，作用强且迅速，不易产生耐药等优点；这些优点，使得抗菌肽类药物有巨大的被开发价值，并具有成为最有可能取代其他抗生素的新型抗菌药物的潜能。虽然抗菌肽的来源非常广泛，可以来源于动物，植物，微生物等；但是抗菌肽的工艺化生产还有许多问题需要解决。在天然抗菌肽很少，人工合成抗菌肽成本太高的形势下，寻找一个能大量合成抗菌肽，并且成本相对比较低的抗菌肽的制备方法是本文的目的。本文通过查阅大量的相关文献，综合实际情况，选择使用DNA合成仪合成抗菌肽基因，以大肠杆菌作为表达系统并通过融合表达的方式来生产抗菌肽。根据大肠杆菌密码子偏爱性和稀有密码子改造抗菌肽基因，首先以数据库作为理论基础，以计算机软件作为理论辅助，理论上筛选出抗菌活性的抗菌肽，再通过实验来进一步筛选，最终选出最优异的抗菌基因，然后通过基因工程制备出抗菌肽；最后通过TTC微量稀释法检测抗菌肽抑菌活性。关键词：抗菌多肽；生产工艺；基因工程；抑菌活性；AbstractAntimicrobialpeptidesaremembersoftheantibioticfamily.Inrecentyears,anurgentproblemisthattheoveruseofantibioticsleadstoantibioticresistance.Antimicrobialpeptideshavemanyimportantadvantagessuchasbroadspectrumantimicrobial,strongandfasteffect,anduneasytoproducedrugresistance.Theseadvantagesmakeantimicrobialpeptidespossesstremendousvalueonthefieldofnewdrugsdevelopmentandthusthepotentialtobecomeaperfectalternativeofantibiotics.Althoughantimicrobialpeptidescanbeobtainedfromwiderangeofsources,forinstanceanimals,plantsandmicroorganisms,therearemanyproblemsneedtobesolvedbeforeits’factoryproduction.Nowadays,seldomnaturalantimicrobialpeptidesareavailableandthesynthesisofthesepeptidesisexpensive.Therefore,theaimofthisstudyistodevelopaneffectivestrategyforproducingantimicrobialpeptidesatrelativelylo