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第二章核酸 Nucleicacid (5个学时)概述1889年,Altmann从酵母和动物组织中提取出不含蛋白质的核酸; 1902年,E.Fischer因研究糖和嘌呤获诺贝尔化学奖;其中的嘌呤和嘧啶主要由Kossel等人鉴定; 1909年,Levene和Jacobes鉴定D-核糖; 1910年,Kossel因核酸化学的成就而获诺贝尔生理学奖; 1912年,Levene提出“四核苷酸假说”; 1944年,Avery的肺炎双球菌转化试验; 1952年,Chargaff定则的提出; 1953年,Watson和Crick提出DNA双螺旋结构; 1958年,Crick提出“中心法则”; 1970年,Smith和Wilcox发现限制性内切酶; 1973年,Cohen获得第一个DNA体外重组体; 1975年,Sanger发明酶法DNA快速测序; 1985年,Mullis发明PCR技术;1928年,英国Griffith S型肺炎球菌:有荚膜,菌落表面光滑 R型肺炎球菌:没有荚膜,菌落表面粗糙 结果说明:加热杀死的S型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质,可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌。 这种生物分子或遗传物质是什么呢?第一节核酸的概念与组成成分1、脱氧核糖核酸(DNA) DeoxyribonucleicAcid98%核中(染色体中) 真核线粒体(mDNA) 核外 叶绿体(ctDNA) DNA拟核 原核 核外:质粒(plasmid) 病毒:DNA病毒2、核糖核酸(RNA) RibonucleicAcid RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达,分子量要比DNA小得多。RNA为单链分子。 根据RNA的功能,可以分为mRNA、tRNA和rRNA三种。 rRNA(ribosomalRNA) 核糖体RNAtRNA:(transferRNA) 转移、转运、受体RNAmRNA:(messengerRNA)信使RNA已经发现的RNA种类RNA在蛋白质合成中的作用核酸的化学组成核酸 1、戊糖稀有碱基(微量碱基、修饰碱基)3、核苷与核苷酸核苷酸八种核苷酸如下表所示4、生物体内某些重要的核苷酸衍生物(2)环核苷酸:cAMP、cGMP(3)肌苷酸及鸟苷酸(强力味精)5、核苷酸的生物学作用第二节DNA的结构T核酸一级结构的简写形式二、DNA分子的结构2、DNA的二级结构—— Watson和Crick的双螺旋结构模型双螺旋模型特征结构碱基间的氢键碱基成对规律→ 当一条链的碱基顺序确定,则另一条必有相对应的碱基顺序,但两条链的碱基组成和排列顺序并不相同。 5,—ATTGCTA—3, 3,—TAACGAT—5, 双螺旋结构的稳定因素:问题: DNA双螺旋模型的提出有什么意义? DNA双螺旋分子通过扭曲和折叠所形成的特定构象。 原核生物DNA、真核生物细胞器DNA的三级结构是超螺旋 真核生物染色体DNA的三级结构是核小体。 第三节RNA分子的结构Bulge-凸起;hairpin-发夹1、tRNA的结构tRNA的三叶草型二级结构包含有3’-末端和5’-末端 3’-末端是CCA 携带氨基酸环:8-12个核苷酸 臂:3-4bp tRNA的三级结构——倒L型2、mRNA的结构3、rRNA的结构动物细胞核糖体rRNA有四类:5SrRNA,5.8SrRNA,18SrRNA,28SRNA 许多rRNA形成发夹形结构 第四节核酸的性质7、颜色反应二、核酸的紫外吸收天然核酸紫外吸收值小于各成分核苷酸光吸收之和(为什么?) 是有规律的双螺旋结构中碱基紧密地堆积在一起造成的。 三、核酸的水解根据底物分:DNase和RNase 根据作用方式分:核酸外切酶和核酸内切酶。 核酸外切酶:从多聚核苷酸链的3’-端或5’-端开始,逐个水解切除核苷酸; 核酸内切酶:从多聚核苷酸链中间某个位点开始切断磷酸二酯键。其中限制性核酸内切酶特异性地水解核酸中某些特定碱基顺序部位。四、核酸的变性、复性及杂交DNA的变性过程2、变性重要特征——判断变性的标志3、DNA的热变性影响Tm值的因素:4、复性紫外吸收值A260降低(减色效应) 复性的特征比旋上升,粘度上升。 生物活性部分恢复。 5、核酸的分子杂交(hybridization)4、生物体内某些重要的核苷酸衍生物问题: DNA双螺旋模型的提出有什么意义? 第三节RNA分子的结构1、tRNA的结构第四节核酸的性质根据底物分:DNase和RNase 根据作用方式分:核酸外切酶和核酸内切酶。 核酸外切酶:从多聚核苷酸链的3’-端或5’-端开始,逐个水解切除核苷酸; 核酸内切酶:从多聚核苷酸链中间某个位点开始切断磷酸二酯键。其中限制性核酸内切酶特异性地水解核酸中某些特定碱基顺序部位。