生物分离工程电泳技术学习教案.pptx

会计学本章(běnzhānɡ)主要知识点SDS-PAGE电泳的基本原理及过程
琼脂糖电泳的特点及其应用(yìngyòng)
等电聚焦电泳的基本原理
双相电泳的概念及其特点学习总体(zǒngtǐ)要求电泳(diànyǒnɡ)概念电泳(diànyǒnɡ)的简单原理/Stoke’sLaw（斯托克斯定律(dìnglǜ)）电泳迁移率电泳(diànyǒnɡ)的大致分类区带电泳(diànyǒnɡ)的主要技术凝胶电泳丙烯酰胺的聚合(jùhé)影响聚合的主要(zhǔyào)因素聚丙烯酰胺凝胶电泳中的分子筛效应(xiàoyìng)分子筛效应(xiàoyìng)琼脂糖凝胶的性能(xìngnéng)、结构与特点电泳(diànyǒnɡ)新介质电泳(diànyǒnɡ)系统的基本组成电泳洗脱仪：回收样品
凝胶扫描和摄录装置：对电泳区带进行(jìnxíng)扫描，从而给出定量的结果。垂直(chuízhí)电泳槽及灌胶模具电泳(diànyǒnɡ)的一般过程/常规(chángguī)聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳前的准备(zhǔnbèi)工作缓冲(huǎnchōng)系统的选择原则离子(lízǐ)强度的选择凝胶浓度(nóngdù)的选择凝胶浓度太大，孔径小于样品分子尺寸，电泳时蛋白质分子不能进入凝胶，样品仍留在加样位置；
凝胶浓度太小，孔径太大，样品中各种蛋白质分子均随缓冲液推进(tuījìn)，不能得到很好的分离；凝胶浓度
(C=2.6%)PAGE的具体操作过程(guòchéng)SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE的原理(yuánlǐ)蛋白质样品用SDS处理后亚基的解聚和分子形状(xíngzhuàn)的改变未知蛋白质分子量的测定(cèdìng)载体两性(liǎngxìng)电解质pH梯度等电聚焦工作(gōngzuò)原理载体两性(liǎngxìng)电解质pH梯度等电聚焦原理等电聚焦(jùjiāo)分离示意图常规(chángguī)PAGE和等电聚焦电泳的区别载体(zàitǐ)两性电解质和pH梯度的形成用于等电聚焦的主要(zhǔyào)载体两性电解质pH梯度(tīdù)的形成其次，一些低pI的载体两性电解质（荷其次多的负电）也向阳极移动，直到它的净电荷减少到0才停止。同样的，其周围环境溶液pH值也等于它本身的pI。依次类推，所有的载体两性电解质分子用增加pI级数的方法将分别在阳极、阴极(yīnjí)之间到达它们自己的位置，从而给出一个pH梯度。载体两性电解质在电场(diànchǎng)中形成pH梯度的模式图水平(shuǐpíng)等电聚焦电泳/等电聚焦的主要(zhǔyào)应用双相电泳(diànyǒnɡ)//本章(běnzhānɡ)作业