十七 常用培养基配方.doc

十七常用培养基配方
17.1营养琼脂培养基
成分
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化钠5g
琼脂15~20g
蒸馏水1000mL
制法：
将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2ML，校正PH7.2—7.4，加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装在三角锥瓶中，在121℃下高压灭菌15分钟。
17.2乳糖胆盐发酵管培养基（单料）
成分
蛋白胨20g
猪胆盐5g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液25mL
蒸馏水1000ml
PH7.4
制法
将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正PH值，加入指示剂分装，每支管10ml，并放入一个小倒管（产气管），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.3乳糖发酵管培养基（单料）
成分
蛋白胨20g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液25ml
蒸馏水1000ml
PH7.4
制法
将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂分装，每支管3ml，并放入一个小倒管（产生气），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.4伊红美琼脂（EMB）培养基
成分
蛋白胨10g
乳糖10g
磷酸氢二钾2g
琼脂2g
2%伊红溶液20ml
0.65%美兰溶液10ml
蒸馏水1000ml
PH7.1
制法
将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于三角锥瓶内，在121℃下高压灭菌15分钟后备用。临用时加入乳糖并加热熔化琼脂，冷却至50—60℃，加入伊红和美蓝溶液摇匀，浇注平板。
17.5远藤氏培养基
配方：
蛋白栋10.0g
乳糖10.0g
磷酸氯二钾3.5g
亚硫酸氢钠2.5g
碱性品红0.4g
琼脂10.0g
蒸馏水100ml
制备：
配料放入蒸馏水中，搅拌15分钟，使其溶解，分装到三角瓶或试管，121℃灭菌20分钟，冷却后贮于暗处，最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。
17.6UBA培养基
酵母浸膏6.1g
蛋白胨15g
番茄汁（244ml）12.2g
葡萄糖16g
K2HPO40.31g
KH2PO403.1g
MgSO·7H2O0.12g
NaCl0.006g
FeSO4·7H2O0.006g
MnSO4·H2O0.006g
琼脂12g蒸馏水750ml
啤酒250g
将上述配料加入水中，加热至沸，搅拌至完全溶解，趁热加入未脱气的啤酒，轻轻搅拌混合，用HCI或NaOH调pH为6.0+0.1，分装于三角瓶中，，121℃蒸汽灭菌20min。待冷却后，放置在36±℃培养24h小时备用。
17.7乳酸杆菌培养基
UBA+ABP抑制剂溶液（UBA见前）
ABP抑制剂溶液
配料
放线菌酮0.1g
溴甲酚绿0.15g
无离子水80ml
2-苯乙醇20ml
配制
把溴甲酚绿放入50毫升水中，煮沸至完全溶解，把放线菌酮溶于30毫升水中，将两种溶液混合，分装于带螺旋盖的瓶中，每瓶20毫升，在121℃蒸汽灭菌10分钟，冷却后，每个瓶内加5毫升2-苯乙醇，并拧紧瓶盖。该溶液会分成两层，使用前须用力摇匀。
17.8KOT培养基
配方
胰朊酶蛋白胨5.0g
麦汁浸出生2.5g
酵母浸出物2.5g
肝浓缩物1.0g
麦芽糖5.0g
葡萄糖5.0g
L-苹果酸0.5g
吐温-801ml
K2HPO40.5g
MgSO4·7H2O0.125g
MnSO4·5H2O0.025g
盐酸半光氨酸0.5g
胞苷0.2g
胸苷0.2g
啤酒800ml
放线菌酮100ml
NaN350mg
琼脂20g
蒸馏水至100ml
PH25.4
17.9日本KL-2B培养基
配方：
胰蛋胨20.0g
麦汁浸生物10.0g
酵母浸出生5.0g
麦芽糖10.0g
K2HPO43.0g
MgSO4·7H2O1.0g
MnSO4·5H2O0.25g
柠檬酸2.75g
吐温-80100mg
NaN350mg
琼脂20g
蒸馏水至1000ml
PH5.2
17.10MRS麦芽糖琼脂培养基
没有一种单独的方法能够检测所有的乳酸细菌，这些细菌对各种糖的利用能力是有差别的，许多菌株能在好氧条件下在琼脂培养基上生长，而另一些菌株则更容易在厌氧条件下生长。
下面列出的培养基，能检测出许多种的乳酸细菌。但是，这些培养基不是绝对的，使用者可根据自己的经验进行修正后采用。
原理：液体样品培养在含有合适的不同种类琼脂培养基的培养皿中，计算活菌落数。
麦芽糖5.0g
蛋白胨10.0g
牛肉浸膏粉8.0g
酵母浸出物4.0g
葡萄糖20.0g
吐温-801.0ml
K2HPO42.0g
醋酸钠5.0g
柠檬酸铵2.0g
MnSO4·5H2O0.2g
MgSO4·7H2O0.05g
琼脂15g
在蒸馏水中溶解，并定容至1L。用1.0NHCl或0.1NNaOH调至4.7。蒸汽