正交法优化三七提取工艺的研究.docx

正交法优化三七提取工艺的研究
【摘要】目的优选三七的最佳提取工艺。方法以三七皂苷R1和人参皂苷Rg1为指标进行正交试验，采用胶束毛细管电色谱法测定含量，优化影响三七提取工艺的条件。结果4倍量70%乙醇回流提取2次，每次，乙醚、正丁醇统一处理所得提取液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的含量最高。结论试验结果可为三七提取工艺的确定提供实验依据，该优化工艺可为工业生产提供参考。【关键词】三七；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；胶束毛细管电色谱StudyonprocessforextractionofPanaxnotoginsengbyorthogonalexperiments【Abstract】ObjectiveTooptimizetheconditionsfortheextractionofPanaxConditionsfortheextractionwerestudiedbyorthogonalexperimentaldesignasguidedbythecontentofnotoginsenosideR1andginsenosidesRg1presentintheTheoptimumconditionfortheextractionofwastocircumfusetheherbin70%alcoholfortwice，thencollectanamountcorrespondingto4timesofthequantityofThemostcontentofginsenosidesRg1andnotoginsenosideR1inPanaxnotoginsengwasdeterminatebyMEKCafterthecollectionwastreatedwithetherandTheexperimentalresultscanbeusedforconfirmingprocessforextractionofPanaxnotoginsengandofferingreferencesforit’sindustrialproduction.【Keywords】panaxnotoginseng；notoginsenosideR1；ginsenosideRg1；capillaryelectrophoresis中药三七为五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)的干燥根，皂苷类是其主要药效成分。文献报道三七总皂苷含量约为12%［1］。胶束毛细管电色谱法以其高效、快速、微量的优势在药物分析中得到广泛应用［2，3］，本文采用三七皂苷R1、人参皂苷Rg1两个指标成分通过正交试验确定三七的最佳提取工艺。1仪器与药品1仪器HP3DCE毛细管电泳仪；未涂层石英毛细管柱；pH计；超纯水机。2药材三七药材；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；乙腈；超纯水；其他药品均为分析纯。2方法及结果毛细管电泳条件以pH为，/L的硼砂-硼酸缓冲体系加25mmol/L的SDS与乙腈4∶1为电泳缓冲溶液，以未涂层石英毛细管柱为分离通道，压力进样，分离电压20kV，检测波长202nm，所有溶液在使用之前均用聚乙烯滤膜过滤，并超声除去细小气泡，每次电泳分离前，毛细管柱先用/LNaOH、超纯水和电泳介质依次分别冲洗、、，然后进行分离和测定。对照品、内标及供试品溶液的配制对照品溶液的配制精密称取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1对照品和，50％甲醇定容于2ml容量瓶中，制备成/ml、/ml的对照品溶液，4℃储藏待用。内标溶液的配制精密称取淫羊藿苷，50％的甲醇定容于10ml容量瓶中，制备成/ml的内标溶液，4℃储藏待用。供试品溶液的配制收集提取液，用乙醚和水饱和的正丁醇各萃取3次，回收正丁醇，残渣用50%的甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，4℃储藏待用。试验方法提取方法选择乙醇为溶媒，用热回流法对三七总皂苷进行提取，考察对提取效率影响较大的4项因素：溶剂浓度、溶剂用量、回流次数、回流时间，每个因素各取三个水平。采用L9正交表进行试验，以提取液中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1为考察指标，选择最佳提取工艺。正交试验及结果根据预试结果，拟定4个因素，每个因素3个水平。因素水平表见表1。表1因素水平表取三七药材，共取9份按下面正交表回流提取。因为此表中无空白列，以重复数据估算误差，重复数为3［4］。三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1均为已知成分，因此在进行方差分析时采用综合加权评分法，将两者中含量最高的项共定为100，结果为其综合评分。实验方案及结果见表2。对以上结果进行方差分析。结果见表3。表2正交试验设计及试验结果表3方差分析表结果由表2直观分析可见，各因素对三七的提取率的影响结果是ACBD，最佳水平组合为A3B1C3D2。由表3方差分析可见，溶剂浓度对实验结果有显着性影响，其他因