转基因技术与作物育种.ppt

第十三章转基因技术与作物育种基因工程原理：应用人工方法把生物的遗传物质（主要是DNA），在体外进行切割、拼接和重组，然后将重组了的DNA导入某种宿主细胞或个体中，从而改变它们的遗传特性；有时还使新的遗传物质在新的宿主细胞或个体中大量表达，以得到基因产物。基因工程的别名转基因育种的优势一、转基因技术的发展现状全世界转基因的种植面积：1996年的280万公顷，2001年增加到5260万公顷，至2005年，种植面积增至9000万公顷；
种植转基因的主要国家：美国、阿根廷、加拿大、中国等；
种植主要转基因作物：大豆、玉米、棉花和油菜；
转基因作物的主要目标：抗除草剂、抗病虫性；
我国转基因作物：
转Bt基因的抗虫棉、延迟成熟的转基因番茄、抗病毒病的转基因甜椒等。
如我国转基因抗虫棉种植面积达4000多万亩，而国产转基因抗虫棉种植面积达到70%左右，其中河北、山东、河南、安徽4省实现了100%的种植。二、转基因育种的程序Bt基因及其应用蛋白酶抑制剂基因及其应用几丁质酶和β－1，3葡聚糖酶基因耐除草剂基因及其应用面包烘烤质量的种子贮藏蛋白改良（二）目的基因的获得从基因组DNA或mRNA序列克隆基因
1、PCR技术在植物基因克隆中的应用
2、基因文库技术分离目的基因
3、mRNA差别显示技术分离差别表达基因

PCR直接扩增克隆目的基因方法：
根据已知基因的序列，设计并合成一对引物；从植物中提取DNA进行PCR扩增；
扩增片段的纯化；
酶切纯化的扩增片段及载体，回收酶切片断；
将两片段用连接酶连接；
重组体转化大肠杆菌；
用酶切分析和序列分析检测重组子，并与已知基因序列进行比较；
（二）目的基因重组质粒的构建（三）受体材料的选择受体材料的类型：
愈伤组织再生系统；
直接分化再生系统；
原生质体再生系统；
胚状体再生系统；
生殖细胞再生系统。（四）转基因方法的确定和外源基因的转化
基因枪轰击法：将外源DNA包裹在金粉颗粒表面，借助高压动力射入受体细胞和组织，当微粒上的DNA进入细胞后将整合到植物基因组中并得以表达。
化学刺激法；
高压电穿孔法；
3、种质系统介导基因转化（五）转化体的筛选和鉴定2、转化体的筛选
抗生素抗性基因：如卡那霉素抗性基因NPTII
除草剂抗性基因：如抗除草剂的bar基因。
3、转化体的鉴定
DNA水平的鉴定：southern杂交；
转录水平的鉴定：northern杂交；
翻译水平的鉴定：western杂交。第二节转基因作物品种的选育本章重点掌握内容：基因工程过程示意图