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土壤活性有机质测定方法 土壤活性有机质分类:由于研究角度和方法有所不同,活性有机质产生了许多的称谓,如易氧化有机质(LOM);生物量有机质(MBOM);溶解有机质(DOM);轻组有机质(LFOM);颗粒有机质(POM)等。 每种指标的测定方法如下: 一.易氧化有机质(LOM): 土壤与氧化剂作用后,易被氧化、不稳定的有机质称作LOM。目前常用的氧化剂有两种:K2CrO7与KMnO4。 KMnO4氧化法:(此方法较为常用) 称取过100目筛,约含15mg碳的土壤样品(如:有机碳含量为15g/kg,则称取1g土壤样品)于50mL塑料旋盖的离心管中;加入25mL,333mmol/L高锰酸钾溶液,振荡1h,然后在时速2000rpm下离心5min,将上清液用去离子水以1∶250稀释,在分光光度计565nm下测定稀释样品的吸光率,由不加土壤的空白与土壤样品的吸光率之差,计算出高锰酸钾浓度的变化,并进而计算出氧化的碳量(氧化过程中1mmolKMnO4-消耗0.75mmol或9mg碳)。 KMnO4氧化法:(此法是在测定全量有机质基础上降低某些反应条件,衍生出的测定方法) 1、水合热法:称取磨细(过0.25mm筛)风干土1.50g,放入500mL三角瓶中,准确加入0.5mol/LK2CrO7水溶液10.0mL,轻轻转动,使土粒分散。用量筒将20mL浓H2SO4迅速直接注入土壤悬浊液,立即小心地转动三角瓶,使土壤与试剂充分混匀1min。把三角瓶放在石棉网上30min,然后注入水约200mL,加3~4滴邻菲锣啉指示剂,用0.25mol/LFeSO4标准溶液滴定过量的K2CrO7。 2、0.1mol/LK2CrO7—1∶3H2SO4130℃氧化法:在油浴温度为130~140℃时将0.5g风干土与0.1mol/LK2CrO7)—1∶3H2SO410.0mL共煮5min,冷却后加入30mL水,用0.1mol/LFeSO4标准溶液滴定过量的K2CrO7 二.生物量有机质(MBOM): 生物量有机质是指能被土壤微生物分解利用的部分有机质。即微生物量碳、微生物量氮。 氯仿熏蒸法测定:(此法较为简单,但氯仿为有毒物质,操作复杂)前处理步骤:将新鲜的土样品含水量调节至田间含水量的30%~50%,25℃下密封预培养7~10d,以保持土壤均匀和所得结果的可比性。然后迅速测定土壤微生物量碳、氮,或在低温4℃下保存。采用氯仿熏蒸浸提方法测定土壤微生物量碳、氮,即称取预处理的湿润土壤每份25.0g(烘干基重)放入50mL烧杯中,将其置于底部有少量NaOH、少量水(约200mL)和去乙醇氯仿的真空干燥器中,抽真空后保持氯仿沸腾3~5min,然后,将干燥器移置在黑暗条件下25℃熏蒸土壤24h,出氯仿(倒回瓶中重复使用),除尽干燥器底部的碱,再用真空泵反复抽气,直到闻不到土壤有氯仿味为止。将全部土壤转入250ml三角瓶中,加入约100mL0.5mol/LK2SO4提取液(土水比为l:4),震荡半小时(200转/分)后,迅速用中速滤纸过滤,滤液立即测定或放入-15℃的冰柜中保存。在熏蒸开始的同时,另取等量的土样,直接用0.5mol/LK2SO4用液浸提,同时做空白,每份土壤重复三次。 微生物量碳测定:吸取上述提取液10ml于150ml消煮管(内径24mm)中,加入0.1mol/LK2S04-H2SO4溶液(H2S04浓度为12mol/L)10ml,放入少量抗爆沸物质,摇匀后置于170-180℃的磷酸浴中煮沸10min,冷却后将溶液转移到150ml三角瓶中,加入2滴邻菲罗啉指示剂,用0.05mol/LFeSO4滴定至终点(橙-灰绿-浅绿-砖红)。 土壤微生物量氮测定:取15.0ml滤液于250ml消化管中,加入0.19mol/LCuSO4溶液0.3ml、分析纯浓硫酸5ml、及少量防瀑沸的颗粒物,混合液消化变清后再回流3~5h,用凯氏定氮仪蒸馏,0.02mol/LHCl标准溶液滴定。 计算公式为:SMBC=EC/kEC,SMBN=EN/kEN,式中Ec=熏蒸土壤浸提测定的全碳-不熏蒸土壤浸提测定的全碳,EN=熏蒸土壤浸提测定的全氮-不熏蒸土壤浸提测定的全氮,kEc和kEN分别为所浸提出来的微生物量碳、氮占土壤微生物量碳、氮的比例,即浸提效率,kEc取值0.38,kEN为0.45。 基质诱导呼吸法(SIR):(此法对设备要求较高)将两份潮湿土样(相当于30g烘干土)称重后放入玻璃瓶中,加入适量葡萄糖,在室温下培养30min后将该瓶密封贮于25℃下培养2h后用注射器抽取5ml气体,采用气象色谱仪测定CO2浓度。此法测量的微生物量碳,由下式计算: MBC=5.11+16.18Y 式中,Y为基质诱导呼吸消耗O2的量(μL) 三.可溶性有机质(DOM):(可溶解在水中的有机质,也是