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一株中度嗜盐菌的分离鉴定研究（完整版）实用资料
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第25卷第2期深圳大学学报理工版
Vol125No122021年4月
JOURNALOFSHENZHENUNIVERSITYSCIENCEANDENGINEERING
Apr12021
文章编号:1000-2618(202102-0-06
=化学化工>
收稿日期:2007-06-30;修回日期:2021-02-18
基金项目:国家/9730重点基础研究发展规划资助项目(2004CB185050;黑龙江省重大科技攻关资助项目(CC05S301作者简介:李维国(1961-,男(汉族,吉林省长春市人,吉林师范大学副教授、博士.E-mai:llwghm@tom1com通讯作者:马放(1963-,男(汉族,哈尔滨工业大学教授、博士生导师.E-mai:lmafamg2002@2631net
一株中度嗜盐菌的分离鉴定研究
李维国1,2
,马放1
,魏利1
,苏俊峰1
,王光玉
1
(1.哈尔滨工业大学城市水资源与水环境国家重点实验室,哈尔滨150009;
2.吉林师范大学环境工程学院,吉林四平136000
摘要:为探索中度嗜盐菌在高盐有机工业废水处理中的应用,从山东省威海市路道口盐场晒盐池盐水中分离一株嗜盐菌株YS-1,对该菌株进行原子力显微镜观察、生理生化测定、全细胞脂肪酸分析及16SrDNA序列同源性分析.研究表明,YS-1菌株16SrDNA序列与Halomonassp.
(AB167061的亲缘关系最
为接近,确定该菌株为盐单胞菌属(Halomonassp.,属中度嗜盐菌;在SBR反应器中对其进行强化高含
盐有机废水处理试验,结果表明,菌株YS-1结合海底泥对含盐(NaCl10%、CODCr为1645mg/L的高含盐模拟有机废水进行处理,经72hCODCr去除率为84156%,108hCODCr去除率为96123%.该盐单胞菌具有强化高盐有机废水处理的潜在功能,通过分离筛选中度嗜盐菌强化高盐有机工业废水处理具有潜在可行性.
关键词:中度嗜盐菌;高含盐有机废水;盐单胞菌中图分类号:X172文献标识码:A中度嗜盐菌(moderatelyhalophilicbacteria[1-2]
是一群生活在高盐环境中的微生物,为真细菌,耐
盐能力强,又被称为极端耐盐菌
[3]
,属于极端环境
微生物.能在含有0~32%NaCl的环境中生长,最适盐度为3%~15%.高含盐有机废水是指含有机物和质量分数至少为315%的总溶解性固体物(TDS的废水,属于极难处理的废水之一.如印染、食品、制药、纺织、造纸、化工、石油和农药等许多行业排放大量的高浓度含盐废水,含盐量一般在10%~25%.对此类废水一般采用电解法、膜分离法、焚烧法和深井灌注法等技术处理,但由于这些方法存在成本高或二次污染等缺点,故难以在实际中应用.目前,传统生物法在处理低盐度废水时具有很大的优势,但当质量分数超过315%时,会造成微生物代谢的中度抑制和毒害,使其失去降解能力.耐盐菌和嗜盐菌的存在,为生物法处理高含盐废水提供了理论上的可能
[4]
,国外研究者通过
筛选驯化耐盐菌或嗜盐菌来降解苯酚,去除硝态
氮,还原高氯酸盐,以及探讨高盐对活性污泥和相关废水生物处理工艺的影响,Woolard
[5]
等将一株
从美国大盐湖(GreatSaltLake中分离的中度嗜盐菌用于处理苯酚废水.国内近年来也开展了这方面的研究,菌种大部分来自常规活性污泥通过科学驯化获得,然而,直接分离自高盐环境的嗜盐菌种用于处理高盐有机废水的报道却很少.本研究从威海路道口盐场分离一株中度嗜盐菌YS-1,对该菌株进行原子力显微镜观察,生理生化测定,全细胞脂肪酸分析和16SrDNA序列系统发育分析,进行了强化高盐有机废水处理的试验,为分离嗜盐菌应用于高盐有机废水处理提供了依据.
1材料和方法
111菌种源与实验材料
菌株YS-1分离自威海市路道口盐场晒盐池盐水.培养基:酸水解酪素5g,酵母膏12g,细菌
第2期李维国,等:一株中度嗜盐菌的分离鉴定研究201
蛋白胨6g,柠檬酸三钠3g,KCl3g,MgSO4#7H2O18g,CaCl2021g,FeSO401001g,NaCl70g,海水1000mL,pH值调至715,121e灭菌20min.菌株的分离和纯化:将1mL盐水样置于盛100mL液体培养基的300mL三角瓶中,35e120r/min摇床培养5d,富集菌体.然后,用接菌环取一环富集培养液在预先制备好的大试管(直径30mm,长200mm固体培养基斜面上连续划曲线,每环菌液连续划5个斜面.然后在培养箱35e下培养2~4d,获得斜面单菌落.挑取具有典型特征的菌落,进行多次分离纯化,获得纯培养嗜盐菌菌株.用原子力显微镜观察菌体形态和