HPLC法测定布洛芬片含量设计方案.docx

HPLC法测定布洛芬片含量设计方案
一、设计背景
布洛芬是一种比较常用的非甾体类的抗炎药，是20世纪50年代和60年代，是开发治疗类风湿关节炎“超级阿司匹林”的过程中长期研究的产物，具有缓解各种慢性关节炎的症状等，布洛芬具有优异的消炎镇痛作用，其作用比阿司匹林更强，比其他药物更具有安全性，现如今布洛芬的合成方法也有许多种，在工艺生产过程中形式也各不相同。通过查阅各种相关的文献，对布洛芬进行含量测定，保证其药品质量的安全性、可靠性、准确性，提供更有效的依据，为工业化生产检测需要设计出简便、科学、易懂、适用性强的含量测定法案。

图1布洛芬化学结构
二、设计依据
布洛芬片中的主要成分是布洛芬，其具有抗炎、镇痛和解热作用，《中国药典》（2020年版第二部）采用酸碱滴定法测定布洛芬含量，但由于消耗时间长、误差较大，难以反应实验的真实质量，为进一步完善布洛芬质量控制方法，故使用HPLC法测定本制剂中布洛芬的含量，满足对布洛芬片质量控制的检测要求，达到工业生产的质量标准。
三、设计方案
(一)仪器和试药
1.仪器
LC-10ATvp高效液相色谱仪、紫外检测仪、色谱柱、sartorius赛多利斯BSA224S电子分析天平。
2.试剂试药
（1）标准对照品：购自中国药品生物制品检定院，含量为98．3％的布洛芬片。
（2）检测样品：送检布洛芬片由实习单位提供。
（3）试剂：甲醇、乙腈为色谱纯,其它试药、试剂均为分析纯,水为超纯水。
（二）色谱条件
（1）色谱柱：Ve—nusilMP18柱(4．6mm×250mm，5μm)。
（2）流动相：甲醇一已腈一磷酸二氢钠溶液(0．02mol／L)(50：25：25)。
（3）检测波长：263nm，
（4）流速：1.0ml／min。
（5）柱温：30℃。
（三）溶液的制备
1.供试品溶液的制备
取布洛芬样品20片，进行精密称重。将所取样品研细，精密称取适量(约相当于布洛芬100mg)，放置于容量为200ml的容量瓶中，加入甲醇30ml，超声15min,再加甲醇稀释至容量瓶刻度线，摇匀滤过，即得供试品溶液。
2.对照品溶液的制备
另精密称取布洛芬对照品适量,将其放置于容量为25ml的量瓶中,加入甲醇溶液10ml,超声15min，再加甲醇稀释至容量瓶刻度线，摇匀，即得对照品溶液。

电子分析天平容量瓶
（四）方法学考察
1.色谱系统和系统适用性试验
色谱柱为Ve—nusilMP18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相则为甲醇一已腈一磷酸二氢钠溶液(0.02mol／L)(50：25：25)，检测波长设定为263nm，流速为1.0ml／min。样品的进样量设定为20μl。理论塔板数按照布洛芬计算不得低于3500。分别取布洛芬样品与标准对照品溶液进行测定。
2.回收率试验
精密称取布洛芬供试品细粉适量(大约相当于布洛芬25mg)，将其置于100ml的容量瓶中，并且分别向其中加入布洛芬对照品溶液2、4、6ml，按对照品溶液制备法制成3种不同浓度的溶液各3份，进行样品测定，求得布洛芬样品的平均回收率。
3.线性关系
取“对照品溶液的制备”项下的对照品贮备液适量,分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,分别取10µl注入HPLC仪,记录色谱图。以浓度x(mg/ml)为横坐标,峰面积(y)为纵坐标,进行线性回归,得布洛芬回归方程。根据回归方程，确定线性关系是否良好。
4.精密度试验
精密量取线性关系考察项下的对照品溶液l0μL，重复进样6次，记录峰面积，计算平均值和RSD。根据RSD值的结果，确定仪器的精密度是否良好。
5.重复性试验
取布洛芬供试品细粉适量,共6份,按“供试品溶液的制备”项下方法，平行制备6份供试品溶液,按选定的色谱条件分别进样测定并计算含量。
（五）样品含量测定
取样品适量,按“供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液;另取对照品适量,按“对照品溶液的制备”项下方法制备对照品溶液,各精密量取10µl注入HPLC仪,记录色谱,测定峰面积,并按外标法以峰面积计算含量。
外标法计算公式如下：
C（对照品溶液浓度）×A(供试品溶液峰面积）A（对照品溶液峰面积）×Dw（称样量）w（平均片重）×标示量（规格）×100%

布洛芬片标示量百分含量=

四、设计小结
可以按照上述实施方案的配制溶液、设定相关的色谱条件、进行系统适应性试验（如不符合要求可以更换色谱柱并进行）和测定，最终求得布洛芬片含量，布洛芬的药品标示量一般在95.0%~105.0%之间。样品主峰的保留时间与标准对照品基本一致，所得结果应符合药典的规定，说明用高效液相色谱法能更准确的计算出布洛芬的含量能够满足于对布洛芬片质量控制要求，。
1.若需要分析多个溶液，若分离效果不