分离分析新技术.ppt

超临界流体萃取技术1.超临界流体的特性(1)被提取物的性质
(2)压力的影响
(3)温度的影响
(4)夹带剂的影响蜂胶的SFE纯化流程(1)萃取压力
(2)萃取温度
(3)CO2流量
(4)萃取时间
(5)粒度
(6)夹带剂1.超临界CO2流体萃取穿心莲有效成分

功效：清热解毒、消肿止痛。
有效成分：二萜内酯类化合物(穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯)
传统方法：
水提法：ChP1990淘汰
醇提法：热浸：得率较高、有效成分容易分解或聚合、杂质较多
冷浸：质量较好、杂质少、有效成分不分解、生产周期较长
超临界CO2流体萃取法：所得有效成分含量较高、具有该药的天然香味穿心莲不同提取方法所得浸膏的质量比较2.挥发油的提取

传统提取方法的缺点：易造成挥发油的分解或氧化等；
收率普遍较低
实例：月见草油SFE提取,25MPa,50℃萃取率20%-亚麻酸10.6%
色泽与透明度
-亚麻酸

杏仁油：SFE与石油醚提取工艺比较收油率是后者的2.5倍

薄荷挥发油：23MPa,55℃加7%乙醇夹带剂薄荷醇收率0.16%
比水蒸汽蒸馏法高3倍
比有机溶剂法高0.6倍
四.超临界流体萃取技术展望大孔树脂吸附分离技术牌号生产厂结构比表面积孔径（nm）2.大孔吸附树脂的特点

(1)分离性能优良选择性良好分离效能高脱色能力强
(2)理化性质稳定稳定性高机械强度好经久耐用
避免环境污染和对设备的腐蚀
(3)应用范围广与离子交换树脂相比
pH不变
发酵液分离抗生素
(4)使用方便流体阻力小
(5)溶剂用量少避免乳化现象提高提取效率
(6)可重复使用再生容易
(7)其他方面价格较贵
吸附效率易受流速和溶质浓度的影响
品种有限
操作较复杂对树脂的技术要求较高二.大孔吸附树脂吸附分离技术要求药液的上柱吸附：
（1）泄漏曲线与吸附容量的考察
（2）药液上柱前的预处理
（3）上柱工艺条件的选择
树脂自身特性、样品浓度、pH值、吸附柱径高比、上样流速
（4）树脂的解吸
树脂的清洗、再生：
无水乙醇或95％乙醇洗至无色，大量水洗去醇三.大孔吸附树脂技术
在天然药物提取纯化中的应用1.黄酮类药物的提取
2.皂苷类药物的提取
实例：绞股蓝皂苷
绞股蓝：葫芦科植物绞股蓝的根状茎或全草，多年生草质藤本植物
功效：镇咳、清热解毒
有效成分：皂苷、黄酮类、多糖类“绿色的金子”“第二人参”“人参宝草”

提取工艺：

绞股蓝干茎叶热水浸提浸提除杂树脂吸附

乙醇解吸脱色浓缩干燥粉碎绞股蓝皂苷粉末3.生物碱的提取
4.影响大孔树脂分离纯化天然药物效果的因素
制备色谱技术一.色谱技术的基本原理二.制备色谱工艺流程

单色谱柱：最简单、最为常用，能分离复杂组分的混合物
溶剂消耗量大，回收溶剂的能耗高
模拟移动床色谱：分离效率高、溶剂消耗低、便于连续操作
设备复杂、工艺要求高
柱切换、移动进料和移动接口色谱等：
实现复杂组分分离、大大提高吸附剂生产率、
减少溶剂消耗、减少设备投资和操作费用三.常用的制备色谱工艺2.柱色谱
特殊的柱色谱：
（1）干柱色谱
干法装填－上样－洗脱－推出、切割－谱带溶剂萃取
特点：溶剂消耗很少，操作迅速（15～30min）

（2）真空液相色谱(VLC)
抽真空装柱－低极性溶剂冲柱－上样－洗脱－收集馏分、抽干
特点：操作简便、处理量大（一次可达30g）3.压力液相色谱(PLC)
闪蒸色谱(约0.2MPa)价格低廉、操作方便
低压液相色谱(<0.5MPa)负荷量克级、分辨率有时与HPLC接近
中压液相色谱(0.5～2.0MPa)负荷量1～100g、分离时间短、适宜工业化
高压液相色谱(>2.0MPa)分离效率高、应用范围广
实例：银杏内酯A、银杏内酯B、白果内酯的分离纯化
硅胶H柱(10-40m)流动相：乙酸乙酯－石油醚（8：2）
(5)超临界流体色谱介于液相色谱和气相色谱之间的色谱方法
特点：分离速度快、产品易回收、应用范围广、有可能替代正相HPLC4.离子交换色谱

固定相：离子交换树脂可再生性和重复使用性
交换功能基团：阳离子和阴离子
形态：凝胶型（水溶胀）和大孔型（永久性微孔）
特点：使用方便、成本低廉、重复使用性好、分离速度快
应用范围：生物碱、糖类、氨基酸、蛋白质以及核酸
实例：总生物碱制备
生药粗粉－0.1%HCl渗漉－强酸性阳离子交换树脂－蒸馏水洗
树脂倒出晾干－10%NaOH碱化树脂－氯仿回流－干燥－重结晶5.逆流色谱(CCC)
以液相物质为固定相的液－液色谱
离心逆流色谱(CCCC)：
（1）分离物质的极性范围很宽
（2）没有拖尾现象
（3）样品定量回收
实例：银杏叶中的黄酮糖苷
固定相：水，流动相：乙酸乙酯－乙酸乙酯（异丁醇）－乙酸乙酯/异丁醇(6:4)
高速逆流色谱(HSCCC)6.其他形式色谱
体积排阻色