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酶联免疫技术(ELISA)常用的检测方法------微生物法常用的检测方法----物理化学法常用的检测方法-----生物芯片法常用的检测方法-----酶联免疫测定法1.ELISA的原理 2.ELISA的类型 3.试剂准备:免疫吸附剂 结合物 酶底物的准备 4.对照设定 5.标本的采取和保存 6.结果判断ELISA是一种免疫测定(immunoassay,IA)。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。 ---利用抗原抗体的特异性反应作为识别手段,用酶催化底 物等方法作为显示系统,用微孔板等材料作为载体和分 离系统的一种生物学检测方法。 ---结合物与相应的抗原(抗体)反应后,结合的酶仍能催 化底物生成有色物质,而颜色的深浅可定量待测物的含 量。 酶免疫测定类型1.1抗原抗体反应1.1.2特异性1.1.3最适比例1.1.4敏感性1.4免疫测定在临床检验中的应用 由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广。ELISA的类型固相载体ELISA主要的仪器设备ELISA常用有机试剂样品的取样和提取——取样 1、均质:新鲜样品在均质时,一定要去除与 检测无关的其它组份(脂肪、皮、鳞等)。 (合理的抽样方法抽取样本均质,否则会造成 在同一个样本中检测出不同的实验结果) 2、取样:取均质后,未被水浸泡过的匀浆样 本。(取被水浸泡后的样本可能会造成假阳性)样品的取样和提取——提取宝安康ELISA试剂盒基本原理——间接竞争法ELISA基本的实验过程ELISA基本的实验过程----示意图深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定前注意事项1深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定前注意事项2深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定注意事项1深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定注意事项2深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定注意事项3ELISA板的洗涤深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定注意事项4深圳宝安康检测试剂盒——ELISA测定结果计算标准曲线图示 深圳宝安康克伦特罗试剂盒样本前处理方法2.2.1双抗体夹心法测抗原2.2.2双抗原夹心法测抗体2.2.3间接法测抗体2.2.4竞争法测抗体2.2.5竞争法测抗原2.2.6捕获包被法测抗体 酶免疫测定类型1.1抗原抗体反应1.1.3最适比例ELISA基本的实验过程深圳宝安康检测试剂盒操作——ELISA测定前注意事项1ELISA板的洗涤2.2.3间接法测抗体