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热带医学杂志2010年9月第10卷第9期··1149 [文章编号]1672-3619(2010)09-1149-04·综述· 尘螨分离技术的研究进展 裴伟1综述,松冈裕之2审校 (1.国家家具产品质量监督检验中心(广东)家具检测部防螨性能检测实验室,顺德528300; 2.日本自治医科大学感染免疫学讲座医学动物学部,枥木3290498) 【摘要】尘螨的分离是寄生虫学领域科学研究与防治检测上的一项关键技术。经过数10年的发展,尘螨 分离技术逐步趋于成熟,并逐渐形成了三大类别,即第一类分离法(比重分离)、第二类分离法(筛分离)、第三类 分离法(习性分离)。本文根据其发展状况及各自的特点作一综述。 【关键词】尘螨;分离;检测 中图分类号:R384.4文献标识码:A 尘螨为变应原中的一类,是引起变态反应性疾病的诱样含螨混合物集中于交界液面。拉起橡胶栓封住烧瓶的颈 因之一,主要与哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎等的产生有部,使液面上的漂浮物倾斜流出,放置滤纸通过布氏漏斗 密切的关联[1,2]。尘螨种类繁多,能够对人类产生危害的主进行抽滤,含螨物质被回收于滤纸上,在体视显微镜下观 要有:粉尘螨(DermatophagoidesfarinaeHughes,1961)、屋察和挑取螨虫。此法为经典方法,高效,缺点是常导致螨虫 尘螨(DermatophagoidespteronyssinusTrouessart,1897)、热死亡或损伤虫体。 带无爪螨(BlomiatropicalisBronswijk,Cock&Oshima,1973)、1.2饱和盐水漂浮法 梅氏噬霉螨(EuroglyphusmayneiCooreman,1950)、腐食酪Sasa等[7-9]于1961年创出了一种新的方法,名为饱和 螨(TyrophagusputrescentiaeSchrank,1781)、粗脚粉螨(Acarus盐水漂浮法,该法操作简单,可采用各种容量的三角烧瓶 siroL.,1758)、家食甜螨(GlycyphagusdomesticusDeGeer,来进行操作,回收后螨虫保持存活状态,且回收率高,此法 1778)等,以屋尘螨和粉尘螨的致敏性最强,危害最大[2]。较怀尔德曼烧瓶法为优。具体操作为:取30ml三角烧瓶 鉴于其对人类健康的危害和负面影响,各种防螨产品在世(口径20mm),放入待测样2~3g,加入0.5%中性清洁液 界范围内相继面世,另一方面,针对其中部分产品(例如纺3ml后混匀,加入比重约为1.20的饱和盐水10ml充分 织品),一些国家出台了防螨性能检测标准[3-5]。伴随着生搅拌,加入饱和盐水至瓶口,放置20~30min;清洁液的添 物学与医学免疫学的快速发展,越来越多的研究以尘螨作加使螨虫从待测样中分离,因比重较小而漂浮于水面之 为实验材料,因此尘螨分离技术的研究和应用也较广泛。上。用体视显微镜观察烧瓶口的水面,可发现漂浮的螨虫。 本文对目前已有的尘螨分离技术进行综述。用有柄针或者毛笔捞起,清除掉盐水后即可使用。1970 尘螨分离技术大致可分为三大类:第一类利用提取液年,该作者对这个方法进行了扩展,将其应用于分离成批 的比重,使螨虫上浮而达到分离的目的;第二类采用过筛、培养的螨虫的操作中,待测样是粉状动物饲料,除加入抽 水洗等方法达到分离的目的;第三类利用习性达到分离的滤等步骤外,还添加了离心分离的操作[10]。其后,Sakaki等[11] 目的。对该法又进行了深入研究,认为只回收上层液面中的螨虫 不妥,没有考虑其他部位残存的螨虫。Sakaki将分离容器 1第一类分离法 内的饱和盐水分为四个部分,即上层、中层、内壁以及残留 1.1怀尔德曼烧瓶法物。旧法只回收了上层部分,而其他部分的螨虫未被回收, 20世纪中叶,日本厚生省的《厚生省食品卫生检查指因而影响了最终的回收率。经过改进后,回收了全部液体 针》里,介绍了怀尔德曼烧瓶法可检测食品和药品中的昆和内壁清洗液,获得了很高的回收率,平均检出率高达 虫和螨虫[6,7]。在三角烧瓶里放置一个带有金属柄的橡胶92.3%,改进的方法被称为全层盐水分离法;与原方法相 栓,将待检样或者经试剂处理(盐酸等)的待测物取一定量比,全层盐水分离法从饲料中回收螨虫,检出率高达 放入其中,加入其容量一半的水和10~20ml汽油后充分89.4%,而原方法只有34.9%;鉴于改进后的方法检出率 搅匀,放置30min;加入水使汽油层到达烧瓶颈部,用橡胶高,没有因检测样的不同而导致的检出率波动,所需的实 栓摩擦烧瓶的内面后静置至水层与汽油层清晰分层,待测验器械与试剂较少,成本低廉,操作简便,因此该作者认为 全层盐水分离法可称得上是标准分离法。 1.3有机溶剂漂浮分离法 另外[12]和[13-16]利用有机溶剂来产生 作