牡丹组织培养中褐化的发生原因与防止方法的研究.pdf

沈阳农业大学学报,2006-10,37(5):720-724
JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2006-10,37(5):720-724

牡丹组织培养中褐化的发生原因与防止方法的研究

张俊琦,罗晓芳*
(北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083)

摘要:在牡丹组织培养过程中,褐化现象普遍发生,并影响着牡丹培养物的正常生长与增殖。因此通过改变培养条件、培养
方式以及在培养基中添加抑褐剂的方法,对品种为青龙卧墨池的牡丹组培物褐化的防止进行了研究,结果表明:添加生长素
会加剧启动培养中外植体的褐化程度,暗培养对愈伤组织抑制褐化很有效,悬浮培养未能减缓褐化却能使愈伤快速增殖。吸
附剂聚乙烯吡咯烷酮和结冷胶能够有效地缓解褐化。抑褐剂硫代硫酸钠、抗坏血酸
(PVP)(Phytagel)(Na2S2O3)(VC)
和铜试剂(DDTC)在牡丹的组培中加剧了组织培养物的褐化程度。
关键词:牡丹;组织培养;褐化现象;抑褐剂;外植体
中图分类号:Q94211;S685111文献标识码:A文章编号:1000-1700(2006)05-0720-05

OccurrenceandPreventionMethodofBrownTurning
inTissueCultureofPeoniasuffruticosaAndr

ZHANGJun-q,iLUOXiao-fang*
(CollegeofBiologicalSciencesandBiotechnology,BeijingForestryUniversity,Beijing100083,China)

Abstract:Browningtakesplacegenerallyintissuecultureofpeonyandbecomesseriousduringthewholeprocesses,sothegrowthofcu-l
tureswasaffected.Bymeansofchangingcultureenvironmentandmethod,appendingant-ibrowningintotheculturemedium,toprevent
thebrowningofculturesofP1suffruticosacv.Qinglongwomochiwascarriedon.Theresultsshowedthataddingauxinintotheculturemed-i
umacceleratedtheculturesbrowningintheinitialstageoftheasepticculture.Darkculturewasmosteffectivetopreventcallusbrowning,
theliquidsuspendingcultureproliferatedcallusquicklythoughnotpreventthebrowningeffectively.TheadsorbentPVPandPhytagelper-

formedaneffectiveactioninalleviatingbrowning.However,theanti-oxidant,suchasNa2S2O3,VC,andDDTCwereineffectivetod-i
minishthebrowning,eventurnedworsethedegreeofbrowning.
Keywords:PeoniasuffruticosaAndr;tissueculture;browning;ant-ibrowningchemicals;explant
我国栽培牡丹(PeoniasuffruticosaAndr.)至今已有1500多年历史。牡丹广泛分布于我国[1],作为我国原生
的、古老的特有植物是研究栽培植物起源、人工选择理论,进行科学试验的良好材料[3]。牡丹具有特殊的药用价
值、观赏价值以及较高的经济价值,但其自然繁殖系数小、繁殖速度慢,而且生产周期相对较长,这些都严重地影
响并制约了牡丹的规模化生产[2]。到目前为止,国内外的科研人员已经对牡丹的组织培养技术进行了一些研究,
并取得了一定的进展,但在生产工艺上还存在外植体污染率高、褐化严重、生根与移栽成活率低等问题[3,4]。这使
得以组织培养培方式繁殖牡丹还难以成为可行的商业化生产方式[5]。其中,褐化现象不仅影响牡丹外植体与继
代植株的正常生长与分化增殖,而且还影响愈伤组织的诱导。而在组织培养培过程中往往会因褐化严重而造成
愈伤组织难以继代保存。同时,褐化还在一定程度上影响组培苗诱导生根,从而直接导致植株分化过程中根的形
成及发育不良,而有些植株形成了根,却因褐化严重