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生物化学原理PrinciplesofBiochemistry第十四章RNA的合成:转录和加工DNA的转录参与转录的各因素:依赖DNA的RNA聚合酶催化的转录是不对称的:E.ColiRNA聚合酶:含有α2ββ’σω亚基,其中α2ββ’构成核心酶,负责转录过程中RNA链的延伸。E.ColiRNA聚合酶的三维构像图2.转录单位:RNA链的合成是从模板特定的部位起始的,经过链的延伸终止于特定的模板部位。一般将从转录起始点到转录终止点的整个区域称为转录单位。参与转录的各因素:E.Coli中不同基因的启动子序列转录的起始原核生物转录的过程:转录泡结构原核生物转录的过程: 2.转录的起始:RNA聚合酶到达转录起始点,开始催化核苷三磷酸按照模板链上的碱基顺序合成RNA。此时σ亚基从全酶上脱离下来,解离后的σ亚基再与另一个核心酶组成全酶开始下一轮转录。 3.RNA链的延伸:转录泡延着模板链3’5’方向不断移动,转录泡内RNA链的5’端方向10-12个核苷酸始终与模板链形成杂合体。 4.转录的终止:当RNA聚合酶达到终止子时,RNA转录将终止 转录的进行终止子:具有终止功能的特定的DNA序列,为RNA聚合酶提供终止转录信号的DNA序列。转录的终止不依赖于ρ因子的转录终止(2)依赖于ρ因子的终止子:这类终止子必须在ρ因子存在下转录才发生终止。这类终止子的回文结构中不含GC富集区,回文结构后也无寡聚U。 ρ因子:一种相对分子量约为45kD的蛋白质因子,起协助终止的作用。依赖于ρ因子的转录终止真核生物的转录: 真核生物含有三种RNA聚合酶,根据它们对于α-鹅膏蕈碱敏感度的不同,分为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。 真核生物的RNA聚合酶不能直接识别启动子起始转录,必须在其他的转录因子的帮助下开始转录。 真核生物DNA含有复杂的转录调控结构真核生物三种RNA聚合酶的比较转录后加工原核生物体内的RNA后加工:原核生物的mRNA通常一经转录即进行翻译,大多不进行转录后加工。但tRNA和rRNA都要在转录后经过一系列加工才能成为有功能的分子。原核生物中rRNA前体的加工:E.Coli中rRNA有7个转录单位,每个转录单位由16srRNA、23srRNA、5srRNA以及一个或几个tRNA基因组成。真核生物体内RNA的转录后加工:真核生物体内的tRNA和rRNA和原核生物有些类似,但真核生物的mRNA前体必须经过复杂的加工过程。1.真核生物中rRNA前体的加工:哺乳动物的rRNA前体约为45S,在细胞核中加工最后形成18S、28S和5.8SrRNA.2.真核生物中tRNA前体的加工:通过核酸内切酶和外切酶去除5’及3’端的附加序列;在3’端加上CCA序列;核苷的修饰3.真核生物中mRNA前体的加工:在细胞核内,mRNA的初始转录物被加工为分子大小不等的中间产物,称为核不均一RNA(hnRNA)。hnRNA在转变为成熟的mRNA的过程中,需经以下的进一步加工:真核生物mRNA5’端“帽”结构真核生物mRNA5’端加“帽”过程(2)3’端加polyA尾:(3)内含子的剪切:大多数真核基因是断裂基因,其转录产物中同时含有内含子(插入序列)和外显子(编码序列)。在mRNA的后加工过程中,将通过拼接(splicing)去除内含子,使外显子成为连续序列。真核生物的mRNA剪切初级转录物2’,5’-磷酸二酯键相同的转录产物,不同的剪接方式,最终可生成不同的蛋白质真核生物mRNA剪切举例逆转录SummaryDNA的转录E.Coli中不同基因的启动子序列真核生物三种RNA聚合酶的比较2.真核生物中tRNA前体的加工:通过核酸内切酶和外切酶去除5’及3’端的附加序列;在3’端加上CCA序列;核苷的修饰真核生物mRNA5’端“帽”结构相同的转录产物,不同的剪接方式,最终可生成不同的蛋白质Summary