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2025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/6发酵热的测定 (1)通过测量一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出。 Q发酵=GC(T2-T1)/V Q发酵-----------发酵热;C-------冷却水的比热 G-----------冷却水的流量;T1T2------进出口冷却水的温度;V----------发酵液的体积2025/3/62025/3/62025/3/6(4)测定微生物生长代谢中的耗氧量。 --------发酵过程中生成的发酵热数量; ---------基质完全氧化需氧量与菌体和产物完全氧化需氧量之差,即微生物在生长和代谢过程中所消耗的氧;2025/3/62025/3/62025/3/6二.pH的检测和控制 pH值可用耐灭菌的玻璃电极和银-汞参比电极以及pH 测量仪表的检测系统检测,可连续指示罐内酸碱变化。 微生物反应过程中pH的变化具有一定规律。 ①在微生物细胞的生长阶段,由于所用的微生物菌种不同,相对于接种后的起始pH值有上升或下降趋势2025/3/6引起反应液pH值下降的主要原因有: 1.培养基中的碳/氮比例不当,碳源过多,特别是葡萄糖过量或者中间补糖过多或溶解氧不足,致使糖等物质氧化不完全,培养液中有机酸会大量积累,从而使pH值下降 2.消泡油加得过多; 3.微生物生理性物质的存在,使pH值下降。2025/3/61.调节培养基中的原始pH值,或加入缓冲溶液制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基。 2.可在反应过程中加入弱酸或弱碱进行pH值的调节,进而合理地控制发酵条件,也可通过调整通风量来控制pH值。 3.进行补料,既调节了培养液的pH值,又可补充营养,增加培养液的浓度和减少阻遏作用,进一步提高产率。 2025/3/6三.泡沫的影响和控制 太多的泡沫给反应带来不利的影响 1.使反应器的装填系数减少; 2.造成大量逃液,导致产物的损失; 3.泡沫“顶罐”有可能使培养基从搅拌的轴封渗出,增加了染菌的机会。2025/3/6微生物反应过程产生泡沫的原因 1.由外界引进的气流被机械地分散形成 2.反应过程产生的气体聚结生成的泡沫 培养基的物理化学性质对泡沫形成的表面现象起 决定作用,此外,培养基的温度、酸碱度、浓度 等对过程的泡沫也有一定的影响。培养基中的蛋 白质含量越多,反应液的黏度也越大,越容易起 泡,泡沫多而且持久稳定。 泡沫的控制 化学消泡 消泡机理:1.消泡剂是表面活性物质,降低气泡表面张力,使气泡破裂2.降低机械强度(降低液膜的弹性)3.降低膜表面的黏度。 天然油脂类、高级醇类、聚醚类、硅酮类、氟化烷烃等2025/3/6机械消泡 靠机械强烈振动和压力的变化,促使细胞破裂,或借助机械力将排出气体中的液体加以分离回收,从而达到消泡的作用。机械消泡的优点是不需在发酵液中加入其他物质,减少了由于加入消泡剂所引起的染菌机会和对后续分离的影响。但是机械效果不如化学消泡迅速、可靠、不能根本上消除引起稳定泡沫的因素,而且它还需要一定的设备和消耗一定的动力。 液位电极控制消泡剂的流加 液位电极是根据空气与带有发酵液的泡沫 导电率不同的原理制造。 采用双位式的控制方法,当反应物液面达 到一定的高度时,自动打开消泡剂的阀门,当液面降回到正常时,自动关闭消泡剂的阀门。2025/3/62025/3/62025/3/6生物传感器的特点2025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62025/3/62.肉汤培养法 通常用组成为0.3%牛肉膏、0.5%葡萄糖、0.5%氯化钠、0.8%蛋白胨、0.4%的1%酚红溶液(pH7.2)的葡萄糖酚红肉汤作为培养基,将待检样品直接接入经完全灭菌后的肉汤培养基中,分别于37℃和27℃进行培养,观察微生物生长情况,并进行镜检,判断是否染菌。常用来检查培养基和无菌空气中是否带菌。2025/3/64.发酵过程的异常现象观察法 根据发酵过程出现的异常现象如溶解氧、pH值、排出气中的CO2含量以及微生物菌体的酶活力等的异常变化来检查发酵是否染菌。溶解氧水平异常变化,对于特定的发酵过程具有一定的溶解氧水平,而且在不同的发酵阶段其溶解氧的水平也是不同的。如果发酵过程中的溶解氧水平发生了异常的变化,一般就是发酵染菌发生的表现。2025/3/6由于染菌的杂菌的好氧性不同,产生的溶解氧异常的现象也是不同的。当杂菌是好气性微生物,溶解氧的变化是在短时间内下降,直至接近于零,且在长时间内不能回升;当杂菌是非好气性微生物,而生产菌由于受污染而抑制生长,使耗氧量减少,溶解氧升高。 排气中的CO2异常变化,好气性发酵排出的气体中的CO2含量与糖的代谢有关。对于特定的发酵过程,工