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华中科技大学同济医学院考博分子生物学(专业基础)简答题历年试题汇总 1.顺式作用元件有哪些,并加以解释。2015,2012考 2.人类基因组计划的4张图,各自的意义是什么?3.癌基因激活的主要途径? 问答:1.什么是基因治疗,基因治疗的主要策略是什么?基因治疗的技术及主要内容, 2015, 2014,2013考 问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释?2015,2012考 2014简问答题 1.PCR理,步骤,写出6种PCR衍生技术2013,2014,2009考 2.何谓基因克隆?简述其基本过程。09年 3.重组DNA技术,问答题20分,14年考4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大,原 核调控,真核调控?13年 问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年,09年考简问6.简述反式作用因子的结构特 点及作用方式09年 简问7.简述逆转录病毒的结构特点09年考 问答:真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么?根据他们的结构特征可以分为哪 些类型?它们和DNA相互识别的理是什么?2013年考 问答:试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。2013年考 试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点2012年考 2016年真题 英译中名词解释(20分) 反义RNA;操纵子;限制性核酸内切酶;选择性剪切;抑癌基因;基质诊断;RNA干扰; 粒;genemaping;管家基因 简答题。 真核基因组的结构和功能特点20分 人类基因组的结构特征15分原癌基因的特点15分蛋白质组研究常用技术有那些,简介其 作用。15分当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些?15分 以下为2001-2004年试题及网上答案 一、若要获得IL-2的基因工程产品,你应该怎么做? 基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体 细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作,又叫分子克隆,DNA重组技 术。 1.在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列;在genecard里检索IL-2高表达的组织;同时检索 一下有关文献; 2.如果考虑使用原核表达系统(通常是大肠杆菌表达系统),将IL-2的成熟肽的基因序列找出 (呵呵,我没有检索,不清楚是否有信号肽)进行分析; 3.根据表达载体,设计含有合适酶切位点的、对应成熟肽编码区的引物; 4.提取IL-2高表达的组织的mRNA,RT-PCR,T载体克隆或直接酶切克隆至表达载体中、 测序。 二、试述反式作用因子的结构特征及作用方式(20分) Trans-actingfactor是一类细胞核内的蛋白质因子,能够与顺式作用元件和RNA-pol相互作用, 调节基因转录活性。一般含有DNA结合结构域和转录活化结构域。 DNA结合结构域:(1)Helix-turn-helix含有3个helix,其中helix3与DNA识别结合,helix1 和helix2与其它蛋白质结合。(2)Zenicfinger锌指结构:由相对保守的一段氨基酸序列和锌离 子结合,形成相对独立的功能域,像一根手指插入DNA的大沟。两种类型的DNA结合蛋白有这样 的模序,一是锌指蛋白,另一个是甾体受体。(3)LeucineZipper:亮氨酸拉链,两个蛋白质之 间相互作用,共同建立一个转录复合体。是一种富含亮氨酸的蛋白质形成的二聚体motif。这种motif 可以识别特殊的DNA序列。两个亮氨酸拉链区的反式作用因子依靠疏水力量相互结合,N-端有碱性 氨基酸构成的a-helix能够与DNA结合。Eg:AP1与SV40增强子的结合(4)helix-loop-helix:兼 性a-helix具有疏水面和亲水面,两个具有这种的motif反式因子可以形成dimer。仅靠helix的N- 端有一段富含碱性氨基酸的序列可以与DNA结合。HLH以同二聚体或者异二聚体作用于顺式作用元 件。(5)同源异形结构域homeodomain,同源异性盒是一种编码60aa的序列,长180bp,几乎存 在于所有真核生物中。 转录激活域:与其他转录因子相互作用的结构成分。常见的转录激活结构域有富含谷氨酰胺结 构域,富含脯氨酸结构域及酸性a螺旋结构域。 三试述2型限制酶的功能与特性(20分) 口型酶相对来说最简单,它们识别回文对称序列,在回文序列内部或附近切割DNA,产生带3'-羟基 和5'-磷酸基团的DNA产物,需Mg2+的存在才能发挥活性,相应的修饰酶只需SAM。识别序列 主要为4-6bp,或更长且呈二重对称的特殊序列,但有少数酶识别更长的序列或简并序列,切割位 置因酶而异,有些是隔开的。 ①有特异识别和切割的序列部位 ②DNA分子上两个