PCNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义.doc

PCNA在子宫内膜癌组织中的表达及意义

【关键词】子宫内膜
摘要:目的探讨增殖细胞核抗原（PCNA）在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学技术对23例子宫内膜癌及26例正常绝经期子宫内膜中PCNA表达水平进行检测。每例切片3张，厚度4μm，分别进行HE染色及PCNA测定。结果PCNA在子宫内膜癌中的表达明显高于正常绝经期子宫内膜（P<0.01），与子宫内膜癌组织学分级和手术分期相关。结论PCNA的表达与子宫内膜癌的生物学行为有关，PCNA指数可作为预测子宫内膜癌预后的指标。
关键词:子宫内膜;肿瘤;增殖细胞核抗原
ExpressionofPCNAinendometrialcarcinomas.XUYong-zhong，DENGYing.（ZhangjiajieMunicipalPeople'sHospital，Zhangjiajie427000，Hunan，P.R.China）
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionsandeffectofproliferatingcellnuclearantigen（PCNA）inhumanendome-trialcarcinoma.MethodsImmunohistochemistrywasusedtodetecttheexpressionofPCNAin23casesofendomtrialcarcino-ma.and26normalendometrialtissues.ResultsExpressionofPCNAinendometrialcarcinomawashigherthanthatinnormalen-dometrialtissues（P<0.01）wasassociatedwiththehistologicalgradingandsurgicalstagingofendometrialcarcinoma.Withthein-creaseoftumourgradeandstaging，thePCNAindexincreased.ConclusionPCNAmaybeinvolvedinthecarcinogenesisofen-dometrialcarcinoam.PCNAindexcanbeusefulprognosticatorsofendometrialcarcinoma.
Keywords:Endometrial;Carcinoma;PCNA
增殖细胞核抗原（Proliferatingcellnuclearantigen，PCNA）又称周期素，其表达合成与增殖细胞的增殖周期有关，其量的变化与DNA合成一致［1］。本研究应用免疫组化技术对子宫内膜癌组织进行PCNA检测，探讨PCNA的表达与子宫内膜癌生物学行为的关系。
1材料及方法
1.1标本来源子宫内膜癌标本23例，取自1998年11月～2004年1月在张家界市人民医院诊刮确定为子宫内膜癌患者，其平均年龄（64±6）岁。正常绝经期子宫内膜26例，取自绝经期子宫脱垂行子宫切除及绝经期出血行诊刮内膜病理检查正常者，平均年龄（59±4）岁，无性激素应用史。全部标本经4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，5μm连续切片。
1.2试剂及免疫组化方法小鼠抗人单克隆抗体PCNA（PC10）及SP免疫组化试剂盒购自福州迈新生物制品有限公司，按试剂盒说明书操作，用PBS代替―抗作阴性对照，已知子宫内膜癌阳性切片作阳性对照。免疫组化步骤如下:①切片脱蜡至水。②蒸馏水新鲜配置3%H2O2室温5～10min灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。③微波修复抗原:将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液，pH6.0，微波炉加热至96～100℃，持续20～30min，冷却后进行下一步。④滴加抗原修复液，室温10min。蒸馏水洗3次。⑤滴加正常血清封闭液，室温20min。去掉多余液体，不洗。⑥滴加适当稀释的PCNA，室温120min。0.01MPBS洗2min×3次。⑦滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，20℃20min，0.01MPBS洗2min×3次。⑧滴加试剂SABC，20℃20min，0.01MPBS洗5min×4次。⑨DAB显色。⑩苏木素轻度复染。脱水、透明、封固。显微镜观察［1，2］。
1.3结果判断免疫组化染色阳性反应为棕黄色、黄色，PCNA定位于细胞核。PCNA用增殖指数（Prolif-erativeindex，PI）表示，PI是指PCNA阳性细胞占肿瘤细胞的百分率，并将之分为四级，1%～25%为Ⅰ级，26%～50%为Ⅱ级，51%～75%为Ⅲ级，≥75%为Ⅳ级。其中Ⅰ～Ⅱ级为弱阳性，Ⅲ～Ⅳ级为强阳性。
1.4统计学处理实验数据均采用卡方检验进行统计学分析。
2结果
正常绝经期子宫内膜中可见部分细胞