αv 整合素与卵巢癌细胞增殖及凋亡关系的研究.doc

αv整合素与卵巢癌细胞增殖及凋亡关系的研究
【摘要】目的研究αv整合素与人卵巢癌细胞增殖及凋亡之间的关系。方法MTT法测定细胞增殖情况；吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化；流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡。结果抗整合素αv亚基抗体对HO-8910细胞有增殖抑制作用,呈时间、剂量依赖性；光镜可观察到细胞凋亡的形态学变化；流式细胞术检测结果分析，实验组G1/G0期上升，S期和G2/M期下降，细胞凋亡率上升。结论αv整合素可抑制卵巢癌HO-8910细胞凋亡，促进细胞生存。
【关键词】整合素αv亚基卵巢癌细胞增殖细胞凋亡
AStudyontheRelationshipBetweenαvIntegrin
andOvarianCancerCellProliferationandApoptosis
TANGYan，ZHANGShuang

DepartmentofObstetricsandGynaecology,
theFirstAffiliatedHospitalofLiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001China
【Abstract】ObjectiveThispaperistostudytherelationshipbetweenαvintegrinandovariancancercellproliferationandapoptosisinvitro.MethodsTheproliferationofcellswasdetectedbyMTTmethod;morphologicalandultrastructurechangeswereobservedbyacridineorange(AO)staining;cellcycleandapoptoticpercentagewereanalyzedbyflowCytometry(FCM).ResultsSc-9969couldinhibittheproliferationofHO-8910cellsasdirectrelationofconcentrationsandtimes.Apoptosismorphologywasobservedinsc-9969groups.TheflowcytometryshowedthattheproportionofG1phaseandtheapoptoticratewereincreasedsignificantlyinSc-9969groups,andtheproportionofSphaseandG2/Mphasewasreduced.ConclusionsIntegrinαvsubunitwillbeabletodelaytheapoptosisofOvariancancerandpromotecellsurvival.
【Keywords】Integrinαvsubunit;Ovariancancer;cellproliferation;apoptosis
整合素(integrin)是一类细胞表面受体，介导细胞与细胞外基质蛋白(extracellularmatrix，ECM)的粘附，参与构成ECM——整合素——细胞骨架跨膜信号传递系统，转导可影响细胞生存、生长、增殖及凋亡的信号。组织特异性的ECM可以延长细胞的生存时间并促进这些细胞的增殖与分化。肿瘤细胞的生存、生长、增殖、分化以及浸润、转移等行为与细胞的粘附行为密切相关。纤维粘连蛋白(fibronectin，FN)是一种主要的ECM，可与整合素相互作用，诱发一系列细胞内信号转导机制，调节细胞的粘附、迁移、增殖和分化。FN是αv整合素的配体。本实验采取体外无血清培养，以包被在FN底物上的人卵巢癌HO-8910细胞为靶细胞，用不同浓度抗αv整合素单克隆抗体(sc-9969)阻断癌细胞通过αv整合素受体与其配体FN的相互作用，观察细胞凋亡情况，探讨αv整合素与卵巢癌细胞增殖及细胞凋亡的关系。
1材料与方法
1.1材料
人卵巢癌细胞株HO-8910(中科院上海细胞所提供)；鼠抗人αv整合素单克隆抗体Sc-9969(Santa公司)，纤维粘连蛋白(Sigma公司)；胰蛋白酶、RPMI-1640、吖啶橙(AO)、牛血清白蛋白(BSA)；胎牛血清(华美生物公司)。
1.2方法
1.2.1细胞培养
人卵巢癌HO-8910细胞株，培养基为RPMI-1640内含10%灭活胎牛血清、37℃、5%二氧化碳的饱和湿度培养传代。于实验前一天更换无血清培养基培养过夜在含1%BSA的RPMI-1640培养基内培养。
1.2.2