不同产地首乌药材HPLC指纹图谱的研究.doc

不同产地首乌药材HPLC指纹图谱的研究
作者：刘旭
单位：山东青岛，解放军第401医院药剂科
【摘要】目的建立首乌药材的HPLC指纹图谱，考察不同产地首乌的药材质量。方法采用高效液相色谱法，建立首乌药材的指纹图谱，流动相为乙腈-水梯度洗脱，检测波长为254nm。结果建立的指纹图谱共确定了7个共有峰，结果稳定，重复性好。结论用该方法建立首乌药材的指纹图谱，对首乌药材的质量控制是可行的。
【关键词】首乌指纹图谱高效液相色谱法
Studyonfingerprintofradixpolygonimultiflorifromdifferenthabitatsbyhigh-performanceliquidchromatographyLIUXu,FUQing-jie,YANGXue-mei,etal.DepartmentofPharmacy,No.401HospitalofPLA,Qingdao266071,China
【Abstract】ObjectiveToinvestigatethequalityofRadixPolygoniMultiflorifromdifferentgrowingareas.MethodsHPLCmethodwasusedtoestablishthefingerprintofRadixPolygoniMultiflori,withamixtureofCH3CN-H2Oasthemobilephase,withawavelengthat254nm.ResultsTheHPLCfingerprintsofRadixPolygoniMultiflorihasbeenestablished.Theresultisstable.ConclusionThefingerprintcanbeusedforqualitycontrolofRadixPolygoniMultiflori
【Keywords】radixpolygonimultiflori;fingerprint;HPLC
何首乌（RadixPolygoniMultiflori）是蓼科植物何首乌（Polygonummultiflorum）的干燥块根，主产河南、广东、贵州、湖北、江西等地。何首乌的主要有效成分是蒽醌类、羟芪衍生物（以二苯乙烯苷含量最高）及磷脂类等。临床上分生首乌和制首乌两种饮片，生首乌苦、甘、涩、温，归肝、心、肾经，有解毒、消痈、润肠通便等功效。生首乌经炮制成制首乌后，平性转温、苦味转甘，补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨［1］。本实验旨在研究何首乌药材的指纹图谱，同时也对不同产地首乌药材的质量做了考察。
1仪器和试药
美国Agilent1100高效液相色谱仪；电子分析天平（上海第二天平仪器厂MA110型）。二苯乙烯苷标准品（批号:0844-200003）购自中国药品生物制品检定所；首乌药材由解放军第二军医大学生药教研室鉴定；乙腈、甲醇（色谱纯，MerckKGaA，64271Darmstadt，Germany）。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：AgilentHypersil（250mm×4.6mm，5μm）C18柱；流动相：乙腈－水10：90（15min）→20：80（35min）→30：70（45min）→80：20v/v）；流速：1ml/min；柱温：30℃；检测波长：254nm。
2.2检测波长的选择本实验采用二极管阵列检测器，在分析时进行全波长紫外扫描，并在不同波长下获取数据，经比较后表明254nm色谱图峰形最好，出峰数目适中，各色谱峰相互之间分离度较好，故检测波长定为254nm。
2.3HPLC供试品溶液的制备精密称取首乌药材粗粉（40目）1g，75%甲醇10ml超声提取20min（2次），滤过，合并浓缩滤液，用甲醇定容至10ml，过0.45μm微孔滤膜，即得；另精密称取对照品1mg左右，置25ml容量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度摇匀得对照品溶液（避光保存）；上述样品备HPLC分析使用。
2.4测定指纹图谱的方法考察精密吸取供试品溶液20μl，注入HPLC仪，按2.1项下色谱条件测试，记录60min色谱图。
2.4.1精密度实验精密吸取首乌供试品溶液，连续进样5次，测定HPLC色谱图，结果各共有峰相对峰面积的RSD均小于1.61%，相对保留时间的RSD均小于0.75%，仪器精密度良好。
2.4.2稳定性实验精密吸取同一批药材制备的供试品溶液，分别在放置0，2，4，8，12，24h后测定指纹图谱，结果各共有峰相对峰面积的RSD均小于2.02%，相对保留时间的RSD均小于0.93%，表明样品在24h内稳定性良好。
2.4.3重现性实验平行操作制备5份首乌供试品溶液，测定HPLC色谱图，