卵巢上皮性浆液性肿瘤p16 mRNA表达及其临床意义.doc

卵巢上皮性浆液性肿瘤p16mRNA表达及其临床意义
中国肿瘤临床2000年第27卷第3期
王敏张佳林江森李冠群张淑兰
关键词：p16蛋白卵巢上皮性浆液性肿瘤原位杂交技术
有关抑癌基因p16蛋白在卵巢癌中表达已有报道，但p16基因异常与蛋白表达关系尚有争议，未见到有关应用mRNA原位杂交技术检测卵巢浆液性肿瘤p16mRNA表达研究的报道。本研究应用原位杂交技术对55份手术切除的冰冻新鲜标本进行p16mRNA检测，以探讨p16mRNA表达与卵巢浆液性癌发生、发展及生物学特性的关系。
1材料与方法
1.1标本与来源
收集本院55份新鲜组织标本，分为4组。1)正常卵巢组织8份；2)良性浆液性瘤10份；3)交界性浆液性瘤4份；4)卵巢浆液性癌(ovarianserouscarcinoma,OSC)33份。其中Ⅰ期5例、Ⅱ期2例、Ⅲ期22例、Ⅳ期4例。组织学分级Ⅰ级8例、Ⅱ级18例、Ⅲ级7例。伴有腹水者17例，伴有癌瘤播散者25例，伴有淋巴结转移者8例。
1.2mRNA原位杂交
按“现代分子生物学实验技术”进行。蛋白酶K、原位杂交试剂盒及生物素标记p16cDNA探针均购于北京中山生物技术公司。
1.3结果判定及统计学处理
按Shimizu等的方法，在高倍光镜下根据细胞内红色反应的着色范围和程度判定本方法的结果。率的比较采用四格表确切概率法。
2结果
2.1原位杂交结果
p16mRNA杂交阳性反应物呈红色颗粒状，位于细胞浆内，阳性细胞多呈灶状分布，少数为散在分布，除少部分间质外，大部分间质及其他细胞均为阴性。p16mRNA在OSC中检出率48.5%(16/33)，低于良性浆液性瘤90%(9/10)及正常卵巢组织100%(8/8)，差异均有显著性(P＜0.05)。OSCp16mRNA阳性表达率亦低于交界性瘤(2/4)，交界性瘤亦低于良性瘤，但差异均无显著性（P＞0.05）。
2.2p16mRNA表达与OSC生物学特性关系
早期OSC（Ⅰ、Ⅱ期）p16mRNA阳性表达率100%（其中++～+++者占71.4%）高于晚期34.6%（其中++～+++占33.3%），(P＜0.05)。Ⅰ级p16mRNA阳性表达率87.5%(其中++～+++占100%)，Ⅲ级p16mRNA阳性表达率14.3%(其中++～+++为0)，Ⅱ、Ⅲ级p16mRNA阳性表达率36.0%(其中～占11.1%)，Ⅰ级与Ⅲ级、与Ⅱ＋Ⅲ级之间比较差异均有显著性（P＜0.05）。OSC癌瘤播散和淋巴结转移者与无播散和淋巴结转移者p16mRNA阳性表达差异均有显著性（P＜0.05），有腹水和无腹水差异无显著性（P＞0.05）。
3小结
本研究结果发现，p16mRNA在卵巢良性、交界性浆液性瘤和浆液性癌中阳性表达率逐渐降低，OSC与良性瘤及正常卵巢组织之间比较差异均有显著性（P＜0.05）。对于4例交界性浆液性瘤，p16mRNA阳性表达率为50%，但与癌及良性瘤比较皆无统计学意义（P＞0.05）。由于交界性浆液性瘤例数少，尚不能肯定p16mRNA缺失表达是卵巢癌发生中的早期现象，有待于深入研究。p16mRNA表达与OSC生物学行为的关系尚不清楚，本研究结果其表达除在腹水的变化缺乏统计学意义外，皆与癌瘤的恶性程度、自然病程和生物学行为间有密切关系，通常随恶性程度、临床期别的增加，癌瘤播散和淋巴结转移的出现，其p16mRNA阳性表达率也明显降低（P＜0.05）。在所检测的33份OSC组织中，伴有淋巴结转移和癌瘤播散者，其p16mRNA阳性表达率低于不伴有转移及播散者，提示p16基因的失活可能与OSC的转移有关。伴有转移的卵巢癌其临床分期属晚期，说明p16基因的失活参与了OSC的进展，是OSC的一个晚期现象，可能与OSC的早期关系不大。然而，是晚期OSC继发p16表达缺失还是p16表达缺失在OSC的整个病程中是一个恒定的肿瘤标志，对此尚不清楚，只有对大量的同一病人的早、晚期p16基因进行动态检测才能得出明确的结论。
本研究结果还显示，中、低分化OSCp16mRNA阳性表达率显著低于高分化者，提示其表达与OSC细胞的分化程度相关，说明p16基因有可能作为判断肿瘤细胞恶性程度的标志。
作者单位：王敏(中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳市110003)
张佳林(中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳市110003)
江森(中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳市110003)
李冠群(中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳市110003)
张淑兰(中国医科大学第二临床学院妇产科沈阳市110003)