胰蛋白酶水解法提取肝素工艺参数的优化研究.pdf

第20卷第3期黑龙江八一农垦大学学报20(3):72~76
2008年6月JournalofHe黑ilon龙gjia江ng八Aug一ust农Firs垦tLa大nd学Rec学lam报ationUniversityJun第e2200卷08

文章编号:1002-2090(2008)03-0072-05

胰蛋白酶水解法提取肝素工艺参数的优化研究

宋大巍,李雷刚,张丽萍
(黑龙江八一农垦大学食品学院,大庆163319)

摘要:在单因素试验的基础上,利用三因素三水平试验设计结合响应面法对胰蛋白酶水解提取肝素的工艺参数进行优化研
究。通过响应面分析建立了回归模型来分析各因素对肝素的提取率的影响,以及个因素间的相互作用。通过典型性分析得到
优化肝素提取条件,优化后的工艺参数为:酶水解温度为55℃;酶水解时间2h;料液比1∶15,此条件下肝素得率理论值为
211.34mg·kg-1,验证试验肝素得率为206.83mg·kg-1。

关键词:肝素;响应曲面法;胰蛋白酶水解;提取

中图分类号:O658.9文献标识码:A

StudyonOptimizationofProcessingParameters
ofTrypsinaseHydrolysisExtractionHeparin

SongDawei,LiLeigang,ZhangLiping
(Collegeoffoodstuff,HeilongjiangAugustFirstLandReclamationUniversity,Daqing163319)

Abstract:Basedontheresultsofsinglefactorexperiment,athree-levelandthree-factorexperimentaldesigncombinedwithresponse
surfacemethodology(RSM)wasappliedtooptimizethetrypsinhydrolysisextractionconditionsofHeparin.Amathematicalmodelwas
thendevelopedtoshowthesignificanteffectofeachfactorandtheirinteractionsontheyieldofHeparin.TheResegAnalysiswasusedto
estimatedtheyieldofheparin,theoptimizedparameterswere:enzymichydrolysistemperatureat55℃,enzymichydrolysistimeat2
hours,andratioofmaterialsolutionwere1∶15.Thetheoreticyieldofheparinwas211.34mg·kg-1,andundertheverificativetestcondition
thepracticalvalueswas206.83mg·kg-1.

Keywords:Heparin;responsesurfacemethodology;trypsinhydrolysis;extraction

肝素(heparin)是一种酸性粘多糖,具有强抗凝作加工的内脏原料,如果合理利用这些原料,将产生巨
用,是抗血栓疾病的首选药物,在肝素链中存在一种大的经济效益。利用动物内脏加工肝素和类肝素前
独特的五糖单位,可与抗凝血酶相互作用,帮助其实景广阔。在提取肝素的过程中,影响肝素得率的因素
现抗凝血功能[1]。随着研究的深入,发现肝素不但具很多,如盐浓度的选择、提取温度、提取时间及料液
有抗凝和调整血脂的作用,还有抗炎、抗过敏、抗病比等,必须经过大量试验进行探索研究,而大多数的
毒等多种生物学功能[2]。我国生产的肝素一般以猪研究采用正交试验来优化提取工艺[3,4],用响应面
小肠黏膜为原料,生产出的肝素抗凝活性高于牛肺法(RSM)优化肝素提取工艺的研究报道较少[5]。响
肝素,在国际市场上很受欢迎。黑龙江省生猪存栏应面法(RSM)是SAS统计分析软件中很重要的分
1532.1万头,生猪年屠宰能力突破900万头,年屠宰析工具[6],如果采用合理的试验设计,能以最经济
肉牛能力将达到30万头以上。以内脏占活牛体重的的方式,很少的试验数量和时间对实验进行全面
16%,活猪体重的7%计算,每年至少有7万t可供研究,进而用多项式的形式把因子与试验结果的

收稿日期:2008-04-02
项目来源:黑龙江省科技厅“十一五”重点攻关项目“畜禽内脏多肽及多糖高效纯化技术的研究”(GB06B403-3)。
作者简介:宋大巍(1974-),男,黑龙江八一农垦大学2005级硕士研究生。
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