液相色谱-串联质谱法测定奶和奶制品中三聚氰胺残留.doc

液相色谱-串联质谱法测定奶和奶制品中三聚氰胺残留
柳菡1，孙宁宁1，杨雯筌1，刘飞2，丁涛1，徐锦忠1

1.江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，南京，210001，
2.赛默飞世尔科技上海有限公司色谱质谱部，上海，201206

摘要研究报导了高效液相色谱电喷雾串联质谱联用（HPLC/MS/MS）测定奶和奶制品中三聚氰胺残留的方法。三氯乙酸溶液沉淀样品中的蛋白，同时提取目标分析物，强阳离子固相萃取柱进一步富集净化后，利用液相色谱-电喷雾串联质谱测定。方法检测低限为0.05mg/kg，HPLC/MS/MS添加回收率72～87％之间（基质匹配曲线校正），相对标准偏差（RSD）在4.2％～8.2％。

关键词三聚氰胺；奶和奶制品；液相色谱-串联质谱法

Determinationofmelamineresiduesinmilkanddairyproductsbyliquidchromatographytandemmassspectrometry
HanLiu1,FeiLiu2,NingningSun1,WenquanYang1,TaoDing1,JinzhongXu1,
1Animal,PlantandFoodInspectionCenter(APFIC)ofJiangsuEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Nanjing210001
2ThermoFisherScientific,Shanghai，201206

Abstracts:Amethodforanalysisofmelamineresiduesinmilkanddairyproductswasdevelopedbyliquidchromatographytandemmassspectrometry(LC/MS/MS).Trichloroaceticacidsolutionswereusedtoprecipitateproteinsanddissociatethetargetanalytesfromsamplematrix.Aftermatrixpurifiedbystrongcationexchangesolidphaseextractioncartridge,analysescanbeperformedusingHPLC/MS/MSintheselectedreactionmonitoring(SRM)mode.Thelimitofdectionis0.05mg/kgwhenusingHPLC/MS/MSmethod.Themeanrecoverywas72~108％(matrixmatchcalibrationcurve)andthestandarddeviationwas4.2~12.5%byHPLC/MS/MSmethod.
KEYWORDS:melamine;milkanddairyproducts;HPLC-MS/MS

9月上旬，甘肃等地报告多例婴幼儿泌尿系统结石病例，调查结果表明，导致多名儿童患泌尿系统结石病的主要原因是患儿服用的奶粉中含有三聚氰胺。三聚氰胺是一种非食品化工原料，按照国家规定，严禁用作食品添加物。部分婴幼儿配方奶粉中含有三聚氰胺，是不法分子为增加原料奶或奶粉的蛋白检测量而人为加入的。
三聚氰胺(melamine)简称三胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料（结构式见图1），主要用于生产三聚氰胺-甲醛树脂，广泛用于木材加工、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革、电气、医药等行业，目前是重要的尿素后加工产品。此外三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。在部分亚洲国家，它也被用以制造化肥。同时三聚氰胺也是一种名为灭蝇胺的农药的代谢产物[1]。三聚氰胺属非食品用化学物质，食品中严禁添加，为提高奶和奶制品中蛋白质含量而加入大量三聚氰胺后，食用可导致泌尿系统疾病[1]。

图1三聚氰胺化学结构式
Fig.1Chemicalstructureofmelamine
目前测定三聚氰胺的检测方法包括气相色谱法[2]、气质联用法[3-4]、高效液相色谱－紫外或二极管阵列和串联质谱检测方法[5-8]。气质联用方法需要衍生化，过程比较繁琐。高效液相色谱配合紫外或二极管阵列由于其无需衍生化是目前最为常用的检测方法，但是抗干扰能力差，定量限难以满足要求。高效液相色谱串联质谱方法灵敏度高、抗干扰能力强，在三聚氰胺检测中具有优势。
本文介绍了利用高效液相色谱－电喷雾串联质谱联用（HPLC/MS/MS）测定奶和奶制品中三聚氰胺残留的方法。利用三氯乙酸溶液沉淀蛋白，阳离子交换固相萃取柱净化，进行高效液相色谱－串联质谱分析。经过大量样品分析结果表明，该方法快速、简单、抗干扰能力强，可以作为奶和奶制品中三聚氰胺残留的测定方法。

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