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华中科技大学 硕士学位论文 BMP-2活性肽/Ⅰ型胶原/煅烧骨复合材料修复兔桡骨缺损的实验 研究 姓名:李景峰 申请学位级别:硕士 专业:外科学(骨外科) 指导教师:郑启新 20090401 华中科技大学硕士学位论文 BMP2活性肽/I型胶原/煅烧骨复合材料修复 兔桡骨缺损的实验研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院骨外科 硕士研究生:李景峰 指导教师:郑启新教授 摘要 【目的】探讨自行研制合成的BMP2活性多肽与I型胶原复合煅烧牛松质骨复合材 料生物学性能与修复骨缺损的作用。 【方法】①将BMP2活性多肽与I型胶原复合煅烧牛松质骨作为实验组,以I型胶原 复合煅烧牛松质骨作为对照组。通过环境扫描电镜和能谱法以及X射线衍射实验 观察材料表面矿化情况,同时对两组材料进行体外细胞培养,观察细胞生长情况 同时计算两组材料细胞黏附率,初步评价BMP2活性多肽引导I型胶原复合煅烧牛 松质骨表面矿化生成羟基磷灰石结晶的作用与能力。②动物试验分三组。A组: 单纯煅烧骨组;B组:含I型胶原的煅烧骨组;C组:BMP2活性多肽与I型胶原复合 煅烧骨组。取大白兔36只,随机分成三组,建立桡骨中段10mm骨缺损模型,分 别将材料植入兔桡骨缺损处,术后4、8、12周行X线评分,8、12周行组织形态 学观察与评分,比较各组植入材料的成骨作用以及取材后抗折强度。 【结果】①环境扫描电镜下可见实验组煅烧骨表面有矿化羟基磷灰石结晶生成, 而对照组没有;能谱法对实验组矿化骨部分进行钙磷元素检测,矿化物的钙磷比 值为1.63,与羟基磷灰石的钙磷比值理论值1.67非常接近;X射线衍射检测证 实矿化物的成分为磷灰石。②大鼠骨髓基质干细胞分别与两组材料体外复合培养 24h,实验组细胞黏附率明显高于对照组(α<0.05);③36只大白兔均进入结 果分析,术后不同时间X线评分示C组与A组和B组有显著差异性(P<0.05); ④组织学观察,8周时评分为:A组4.67±0.52,B组5.33±0.52,C组6.83 ±0.41。12周评分为:A组评分为6.17±0.41,B组为7.33±0.52,C组为 1 华中科技大学硕士学位论文 8.67±0.52;⑤各组植入材料抗折强度的测定:术后12周,C组材料抗折强度 明显高于A组和B组。 【结论】BMP2活性多肽能引导I型胶原煅烧骨复合材料表面矿化生成羟基磷灰石 结晶,可以改善煅烧骨的骨诱导活性,提高细胞黏附性能,促进骨缺损修复。煅 烧骨复合材料是一种较理想的骨缺损修复材料。 【关键词】煅烧骨;BMP2活性多肽;I型胶原;羟基磷灰石结晶 2 华中科技大学硕士学位论文 ExperimentalStudyofRepairofRabbitRadialBoneDefectsusing TrueBoneCeramicsCombinedwithBMP2-derived PeptideandCollagenI Abstract Objective:Toinvestigatethebioactivityandthefeasibilityof repairofrabbit'sradiussegmentalbonedefectofsinteredbovine cancellousbonecombinedwithaBMP2-derivedpeptideandCollagenI. Methods:①Takingsinteredbovinecancellousbonecombinedwith BMP2-derivedpeptideandCollagenIastheexperimentalgroupandsintered bovinecancellousbonecombinedwithCollagenIascontrolgroup, environmentalscanningelectronmicroscopy(ESEM),Energy-Dispersive spectroscopy(EDS)andX-raydiffraction(XRD)wereperformedonthe samplestoobservethemineralizationonthesurfaceofthecomposite biomaterial.Cellcultureofthetwogroupsofmaterialstoobservecell growthandcalculatethecelladhesionrates,whichinitiallyevaluates thefunctionan