纳米羟基磷灰石_聚氨基酸复合材料生物安全性评价.pdf

第32卷第21期第三军医大学学报Vo.l32,No.21

22942010年11月15日ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAENov.152010

论著文章编号:10005404(2010)21229406

纳米羟基磷灰石/聚氨基酸复合材料生物安全性评价

代震宇1,李军1,赵增辉1,敖晓晓2,蒋电明1(400016重庆,重庆医科大学附属第一医院骨科1,400014重庆,重庆医科
大学附属儿童医院重症监护室2)

[摘要]目的初步评价新型骨修复材料纳米羟基磷灰石/聚氨基酸(nanohydroxyapatiteandpolyaminoacid,nHA/
PAA)的生物安全性。方法按照ISO109931标准中规定以自制nHA/PAA为实验组进行以下实验:体外细胞毒性实
验:采用L929成纤维细胞,完全培养基为阴性对照,苯酚为阳性对照,通过细胞形态学、MTT试验以及流式细胞进行细胞
毒性评价;全身急性毒性实验:以生理盐水为阴性对照组观察2组小鼠腹腔注射材料浸提液和生理盐水后72h内有无
中毒和死亡现象;!致敏试验:白化豚鼠30只均分3组,以生理盐水为阴性对照组、二硝基氟苯丙酮溶液为阳性对照组观
察各组动物致敏区有无红肿和红斑,并记分;∀溶血实验:生理盐水作为阴性对照组,灭菌蒸馏水为阳性对照组,分别加
入抗凝兔血后计算溶血率;#热源实验:新西兰大白兔3只,按10ml/kg注射材料浸提液,测量正常体温与注射后连续
3h内每小时体温的差值;∃遗传毒性实验:KM小鼠30均分3组,分别按100g/kg间隔24h注射材料浸提液、环磷酰胺
及生理盐水2次,观察骨髓嗜多染红细胞及含微核小体的骨髓嗜多染红细胞,并计算微核率。结果体外细胞毒性实验
观察材料对细胞形态与生长无明显影响,MTT检测实验组细胞毒性为1级,流式细胞仪检测材料不会引起细胞凋亡;全身
急性毒性实验显示实验组动物无中毒及死亡;致敏试验显示致敏区无水肿及红斑;溶血实验表明材料溶血率为0.71%,符
合小于5%的实验标准;热源实验显示实验动物无明显体温升高;遗传毒性实验显示材料微核试验阴性,无遗传毒性。结
论nHA/PAA复合材料具有良好的生物安全性。
[关键词]纳米羟基磷灰石;聚氨基酸;L929;细胞毒性;凋亡;生物安全性
[中图法分类号]R318.08;R608[文献标志码]A

Biologicalsafetyofnanohydroxyapatiteandpolyaminoacidcompound
11121
DaiZhenyu,LiJun,ZhaoZenghui,AoXiaoxiao,JiangDianming(1DepartmentofOrthopedics,FirstAffiliatedHospita,l
ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400016,2IntensiveCareUnit,Children∋sHospita,lChongqingMedicalUniversity,Chongqing,
400014,China)

[Abstract]ObjectiveToevaluatethebiologicalsafetyofnanohydroxyapatiteandpolyaminoacid
(nHA/PAA)compound.MethodsAnHA/PAAcompoundwaspreparedaccordingtotheISO109931
standardstocarryoutthefollowingexperiments.Invitrocytotoxicitytes:tL929fibroblastsweredividedinto
negativephysiologicalsalinegroupandpositivephenolgroup.Morphologicchangewasobservedandcytotoxicity
wasdetectedbyMTTassayandflowcytometry.Systemicacutetoxictes:tintoxicationanddeathwereobserved
inmiceinjectedwithasolutionofnHA/PAAcompoundextractionandphysiologicalsaline.!Sensitization
test:thirtymicewererandomlydividedintonegativephysiologicalsalinegroupandpositivedinit