邻二氮菲分光光度法测定微量铁.ppt

邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验目的吸光光度法（AbsorptionPhotometry）：基于物质对光的选择性而建立的分析方法。
包括比色法、紫外可见分光光度法、红外分光光度法。
广泛用于无机物和有机物的定性和定量分析。

2、光谱分区3、物质对光的吸收4、吸收曲线（吸收光谱）吸光度A5、朗伯—比耳定律
布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b
1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝c
二者的结合称为朗伯—比耳定律。朗伯—比耳定律
吸光度A：表征物质对光吸收程度的量。
A=lgIi/It=-lgT=bc

A--吸光度
--摩尔吸光系数
C--被测物浓度
Ii--入射光强标准（工作）曲线
标准（工作）曲线绘制方法：在、b固定的情况下，测定一系列不同浓度的标准溶液的吸光度，作A~c图，在相同条件下测定样品溶液的吸光度，从曲线上可查出被测样品的浓度。
工作曲线图可见分光光度计1、光源2、单色器吸收池用于盛放分析试样；
可见光区只能用玻璃吸收池；
吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向；
吸收池要配对。因为吸收池材料本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。
检测器的功能：检测信号、测量单色光透过溶液后光强度变化。
常用的检测器有光电池、光电管和光电倍增管等。分光光度计的使用分光光度计的保养与维护邻二氮菲法测定微量铁在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+：

此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510=1.1×104L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下：
2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl-
测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。1.配置一系列标准溶液;
2.测定其中一标准溶液的吸收曲线,找到最大吸收波长;(空白溶液为参比)
3.在最大吸收波长处,测定一系列标准溶液的吸光度,作标准曲线;(空白溶液为参比)
4.在最大吸收波长处,测定试样的吸光度
5.根据标准曲线,得到试样中铁含量.1.分别移取10μg/mL铁标准溶液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL
于6个50mL容量瓶中，各加入1mL10%盐酸羟胺，摇匀，
经2min后，再加5mL1mol/LNaAc溶液及3mL0.1%邻二氮
菲，蒸馏水定容。
2.吸收曲线的绘制用1cm吸收池，以试剂空白溶液(1号)为参
比，在440～560nm之间，每隔10nm测定一次标准溶液(2号)
的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收
曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。
3.标准曲线的绘制以试剂空白溶液(1号)作参比，1cm比色
皿，在最大吸收波长处，测定标准系列各个吸光度，以铁含
量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.吸取5mL试样，其余步骤与3同，测定吸光度。由试样的吸
光度在标准曲线上查出相应的铁含量，然后再换算出试样中
的铁含量（mg/L）