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鍾翠萍顏沛欣莊瑞鑫不同環境因子對Pseudomonasfluorescens降解苯酚污染物之效率 第七屆生化工程研討會論文集 明志技術學院學報30期 不同環境因子對Pseudomonasfluorescens降解酚污染物之效率 鍾翠萍、顏沛欣、莊瑞鑫* 元智大學化學工程系 EfficienciesofPhenolBiodegradationbyPseudomonasfluorescenswithDifferentEnvironmentalFactors Tsuey-PingChung,Pei-ShinYan,Ruey-ShinJuang* DepartmentofChemicalEngineering,YuanZeUniversity,Chung-Li320,Taiwan *Fax:+886-3-4559373 E-mail:cejuang@ce.yzu.edu.tw 摘要 本研究主要是探討PseudomonasfluorescensCCRC14347菌種降解酚的情形。首先對不同生長時期之Pseudomonasfluorescens做酚降解實驗,結果顯示Late-exponentialstage降解100ppm酚的降解效率最好。接著收集Late-exponentialstage的菌體,改變對其可能影響最大的四個環境因子(pH值、操作溫度、碳源(Glucose)、氮源(Ammoniumsulfate)),測定酚的降解效率。配合使用實驗設計之應答區面法(亦即Box-Behnken法),將上述每個因素各選擇五個適當條件,經由二階二次多項式加以回歸最適化後,可得知各因素的影響程度及相互效應。統計分析結果顯示,此種回歸模式有不錯的吻合性,其R2值(Correlationcoefficient)高達0.9358,至於F值(Fisher’sFtest)則為14.59。最後,本文亦確定溫度及pH值兩環境因子對降解酚效率之重要性,此外並討論了其最佳的操作條件。 關鍵詞:P.fluorescens、酚、降解、環境因子、實驗設計、應答區面法、回歸模式 莊瑞鑫元智大學化學工程系教授 TEL:(03)4638800轉555 E-mail:cejuang@ce.yzu.edu.tw 鍾翠萍元智大學化學工程系學生 顏沛欣元智大學化學工程系學生 1.前言 苯酚(Phenol)是造紙、煉焦、煉油、塑膠、紡織等廢水中的主要污染物,美國環保署把苯酚列入優先污染物和65種有毒污染物名單,台灣環保署也把酚列入水污染之管制項目。苯酚的污染會傷害棲息地中的動植物,導致食物鏈中有毒化學物質的攝取和累積,濃度過量時,會引起人類慢性中毒,或微量的苯酚(超過0.002mg/L)與消毒用的氯結合時,形成的氯酚是致癌物質,對人類的健康有嚴重的威脅。 清除工業廢水中酚的方法包括:微生物降解、萃取、活性碳吸附、和化學氧化等,其中利用微生物進行降解,發展生物復育技術以清除環境中的有機污染物,不僅能減少對環境的衝擊,亦可得到經濟的效益;因此當細菌被用來清除受污染的環境時,微生物分解芳香族類化合物的基礎研究受到人們深切的關注[3]。 2.材料與方法 2.1微生物菌種 Pseudomonasfluorescens(菌號14347,批號12-17-98,培養基11,溫度30oC)菌種由食品工業發展研究所菌種保存及研究中心所提供。 2.2培養基及試劑 (1)Pseudomonasfluorescens之培養基(Basalmedium):Yeastextract3.0g/L,Maltextract3.0g/L,Peptone5.0g/L,Dextrose10.0g/L,Agar15g/L[1]。 (2)Pseudomonasfluorescens之營養鹽(Minimalmedium):KH2PO40.42g/L,K2HPO40.375g/L,(NH4)2SO40.244g/L,NaCl0.015g/L,CaCl2‧2H2O0.015g/L,MgSO4‧7H2O0.05g/L,FeCl3‧6H2O0.054g/L[1]。 2.3設備 紫外線-可見光譜儀:JascoV-550型,日本分光株式會社。高溫殺菌鍋:AutoClaveTH-104DG型,造鑫實業已有限公司。無菌操作台:HorizontallaminarflowtabletypeTH-22型,造鑫實業已有限公司。恆溫振盪水槽:WaterbathincubatorBT47型,Yamato有限公司。 2.4菌株酚降解效率之測定 將購得之Pseudomonasfluorescens菌種培養於固態Basalmedium上,3