第十章 色层分离法1.ppt

第十章色层分离法第一节概述色谱分离色谱法的发展史石油醚碳酸钙
（固定相）然而，在20多年时间里，他的新分离方法并没有受到科学界的重视。其中一个重要原因是德国著名化学家R.Willstätter对色谱法的排斥和不信任。
Willstätter（1915年获诺贝尔化学奖获得者）1913年在其名著“叶绿素的研究”中，称色谱法是一种“离奇的方法”，认为它不适用于制备工作，在吸附过程中，试样组分可能发生化学变化。他写道：“色谱法只能在试样很少的情况下使用，似乎不适合于制备目的……”
Willstätter的观点，即过分强调制备工作，也反映出当时有机化学家的一种普遍态度。因此，茨维特的技术是超越其时代的。1930年12月，奥地利22岁研究生E.Lederer到海得堡R.Kuhn领导的化学研究所研究类胡萝卜素。他对文献进行了仔细考察，从文献中了解到茨维特的色谱技术。在Kuhn的指导下，他用碳酸钙作吸附剂，在一小色柱中，成功地分离了-、-、-胡萝卜素，并发表了三篇论文，公布了他们的研究成果。这标志着色谱法的复兴。
Karrer在1937年，Kuhn在1938年，Ruzicka在1939年相继获诺贝尔化学奖。从此以后，色谱法得到普遍的公认，成为最有效的分离提纯手段。色谱法的发展色谱法的发展
1931年，Kuhn、Lederer用氧化铝和碳酸钙分离了-、-、-胡萝卜素后才引起重视。Tswett的方法是借助于各组分在固定相中吸附能力的强弱不同而进行分离的，称为吸咐色谱adsorptionchromatography。
1935年，Adams和Holmes合成了离子交换树脂，并用于色谱分离，从而诞生了离子交换色谱法。1941年A.J.P.Martin和R.L.M.Synge发明了分配色谱法（partitionchromatography）。1952年获诺贝尔化学奖。
把氨基酸混合液注入到以硅胶作固定相的柱中，用氯仿作流动相，借助于氨基酸在硅胶中的水相和氯仿中溶解度不同而达到分离
1941年Martin和Synge提出用气体代替液体作流动相的可能性。
1952年James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气液色谱法gas-liquidchromatography。
1957年Golay开创了开管柱气相色谱法open-tubularcolumnchromatography，即毛细管柱气相色谱法capillarycolumnchromatography。
1956年VanDeemter等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论。
1965年Giddings总结和发展了前人的色谱理论。1944年R.Consden、A.H.Gorden和Martin等发展了纸色谱。
1949年Macllean等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄层板使薄层色谱法（thinlayerchromatography）得以实际应用，1956年E.Stahl对TLC的标准化、规范化及应用面做了大量工作并开发出薄层色谱板涂布器之后，才使TLC得到广泛地应用。
1959年Porath和Flodin提出了凝胶色谱法（gelchromatography）。
1967年Porath、Axen和Ernback成功地创立了亲和色谱法（affinitychromatography）。20世纪60年代初，Giddings将气-液色谱理论用于液-液色谱，同时把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱，于60年代末出现了高效液相色谱（HPLC）。
20世纪80年代初毛细管超临界流体色谱（SFC）得到发展，90年代未得到较广泛的应用。
20世纪80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳（Capillaryelectrophoresis，CE），在90年代得到广泛的发展和应用。
同时集HPLC和CE优点的毛细管电色谱在20世纪90年代后期受到重视。一、色谱分离色谱分离二、色谱分离的特点色谱分离的特点（续）色谱分离的特点（续）第二节色谱分离的分类色谱分离的分类一、按分离机理不同分类1、吸附色谱分离吸附色谱分离吸附色谱分离2、分配色谱分配色谱分配色谱3、离子交换色谱4、凝胶色谱（凝胶层析）Gelchromatography凝胶色层分离法原理凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出。凝胶装置图凝胶