抗过敏益生菌唾液乳杆菌PM-A0006调节过敏体质抗过敏.doc

J.Agric.FoodChem.2007,55,11080–11086
Heat-KilledCellsofLactobacilliSkewtheImmune
ResponseTowardTHelper1PolarizationinMouse
SplenocytesandDendriticCell-TreatedTCells
论：热杀死抗过敏乳酸菌唾液乳杆菌PM-A0006调节过敏体质抗过敏

摘要
乳酸菌为人类及哺乳类肠胃道中的共生菌之一，已被认定为益生菌，对于维持宿主健康扮演着重要的角色，包括了其对于免疫功能的调节。目前大部分的研究皆比较着重于乳酸菌的活菌体(viablecell)对于免疫调节作用的影响，而本实验则主要是在于乳酸菌热杀死菌体的影响。我们藉由将三株热杀死乳酸菌L.acidophilusA2、L.gasseriA5和L.salivariusA6与脾脏细胞共同培养，来探讨此三株热杀死乳酸杆菌对于免疫功能所产生的影响。另一方面，我们亦将三株热杀死乳酸菌刺激树突细胞后，以观察T细胞的免疫反应。由实验结果显示三株热杀死乳酸菌证实能刺激小鼠的脾脏细胞增生和interleukin(IL)-10、IL-12p70和interferon(IFN)-γ之分泌，但对transforminggrowthfactor(TGF)-β无影响。另外，三株热杀死乳酸菌亦能刺激小鼠的树突细胞分泌高量的IL-12p70，且由提高IFN-γ分泌，非IL-5、IL-13及TGI-β之结果显示，T细胞的免疫反应趋向Th1。以上结果显示乳酸杆菌(lactobacilli)对于调节免疫机能及过敏反应扮演了重要的角色。
KEYWORDS:Lactobacillus;splenocytes;dendriticcells;Thelper1;cytokines

前言
益生菌被定义为“活菌，能在固有的营养条件下，增进健康”(1)。乳酸杆菌是人和哺乳动物胃肠道的共生微生物的成员之一，通常被认定为益生菌(2,3)。肠道乳酸菌一般被认为对于宿主的免疫反应之调节，扮演着一个重要的角色(1,4-6)。乳酸菌具有影响肠周边免疫系统的功能(5,7)。在肠道中，乳酸细菌细胞壁的组成成分在刺激免疫活性的细胞扮演一个重要的角色(4,5,8,9)。

位于肠中的乳酸菌，包括各种乳酸杆菌，可交互调控肠中的一些细胞，包括抗原呈现细胞(APCs)以及小肠上皮细胞(intestinalepithelialcells)(10-12)。近期的一些报告中也指出，乳酸菌可能可调控免疫路径Th1与Th2之间的平衡，有助于减轻过敏反应1(5,13-15)。一般认为是靠一些特殊的免疫细胞产生的细胞激素，例如：IL-10和TGF-β，来保持这样的平衡(16,17)。而大部份的研究主要针对活的乳酸菌在免疫调节上之影响，而本篇研究则是研究经热杀死的乳酸菌。其拥有保存期限长、贮存方便、便于运输等优点。

图一：
热杀死乳酸杆菌对小鼠脾脏细胞增生之影响。柱状图分别代表脾脏细胞对不同热杀死乳酸菌、PHA或无刺激物之结果，其中后两项为实验对照组。数据资料计算结果为平均数±标准差(个数=3，p<0.05)

由骨髓中衍生的树状细胞(Dendriticcells,DC)，是引发适应性免疫对抗外来病源的专一性抗原呈现细胞(18)。未成熟的树状细胞藉由血液的流动进入非淋巴组织里，例如皮肤和黏膜，来捕捉和呈现抗原。然后移到淋巴腺器官，例如淋巴结、脾脏和黏膜伴生的淋巴组织(mucosal-associatedlymphoidtissues,MALT)，其中他们失去抗原加工活性并且成熟为强有力的免疫刺激细胞(18,19)。在肠黏膜中之树状细胞可能由乳酸菌调控，包括肠中原有的共生菌和经由口服(administeredorally)入内的(20)。他们在Peyer氏斑间接通过M细胞(21)，与乳酸菌交互作用，且绕过紧连的上皮中进入小肠内腔直接与乳酸菌作用(22)。而树状细胞藉由这些微生物的刺激而变成熟，包括上游调节共激分子(costimulatorymolecule)以及cytokines和chemokines的分泌，以及提供各种T细胞的免疫反应。举例来说，树状细胞上游调节了共激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)及产生IL-12，造成Th1路径反应(23)。他们也生产IL-4和IL-10，促进Th2路径或Treg反应(24-26)。

以人类及老鼠的试验中显示，乳酸菌能有效的刺激产生IL-12以及IFN-γ，并且调整免疫反应(13,14,27)，它能调控树状细胞表面的分子表现和cytokine的分泌(28-30)。口服和原本在肠道中的乳酸杆菌，是十分相近于肠黏膜中之树突细胞，藉此产生Th1、Th2和Treg路