愈伤组织培养.ppt

第2章愈伤组织培养第2章愈伤组织培养定义:是指将外植体接种到人工培养基上，在激素作用下，进行愈伤组织诱导、生长和分化的培养过程。第一节愈伤组织的诱导和分化二．愈伤组织的分化Stage1.Induction（诱导期）:诱导期细胞内发生的变化Stage2.Celldivision分裂期1.细胞的数目迅速增加；每个细胞平均鲜重下降。；细胞体积小，内无液泡。
2．细胞的核和核仁增大到最大。
3.细胞中RNA含量减少，而DNA含量保持不变。
4.随着细胞不断分裂和生长，细胞总干重、蛋白质和核酸量大大增加，新细胞壁合成极快。Stage3.Differentiation分化期A细胞分裂部位和方向发生改变：
B形成瘤状或片状的分生组织结节。或维管组织结节。
C细胞的体积相对稳定，不再减少。
D出现了各种类型的细胞：如管胞、纤维细胞、薄壁细胞、分生细胞、色素细胞等。
E生长旺盛的愈伤组织呈乳白色、白色或浅绿色，老化的多转化为黄色或褐色。第二节愈伤组织的继代培养2、愈伤组织培养的调控因素：（一）材料本身1．无机营养
培养基中的N，大多数都用硝态氮，对细胞分化起重要作用。器官分化的植物激素控制理论(激素配比模式)培养基中加入糖、各类B族维生素、肌醇和甘氨酸等，可满足愈伤组织生长和分化的要求。
各种氨基酸和嘌呤、嘧啶类物质，可促进器官分化。
水解酪蛋白中含有多种氨基酸，助于器官分化
酰胺类往往有促进器官形成的作用。
第二节愈伤组织的继代培养（三）培养条件第三节愈伤组织的形态发生外植体愈伤组织的器官发生顺序有四种情况：胚状体（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构。胚状体与合子胚的比较:胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别:胚状体方式比不定芽方式有更多的优点：第四节愈伤组织培养的应用本章小结：谢谢!