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实验影响酶促反应速度的因素
实验目的
通过本实验了解温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
实验原理
唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色；糊精根据分子大小，与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色；麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。
温度：温度降低，酶促反应减弱或停止；温度升高，反应速度加快。当上升至某一温度时，酶促反应速度达最大值，此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质，温度过高会导致蛋白质构象的改变，因此如果温度继续升高，反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。
酸碱度：唾液淀粉酶最适pH为pH6.9，高于或低于酶的最适pH值，都将引起酶活性的降低，过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。
抑制剂与激活剂：酶的活性常受某些物质的影响，能增加酶的活性称为酶的激活剂：降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如Cl-为唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。
根据上述性质，可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度，间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。
三、试剂及器材
1.试剂：
1％淀粉溶液，1％氯化钠溶液，1％硫酸铜溶液，1％硫酸钠溶液，碘液，磷酸氢二钠（0.2mmol/L）,柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。
2.器材：
试管，试管夹，恒温水浴锅(37℃),吸管，滴管，试管架。
四、实验操作：
1.收集唾液：实验者先将痰咳尽,用自来水漱口,清除口腔内食物残渣,再含蒸馏水约15mL,作咀嚼咕漱运动,3min后吐入小烧杯中备用。
2.观察温度对酶促反应速度的影响
取试管3支，编号1,2,3，按下表操作：
试剂(ml)123唾液1111%淀粉222水浴5min100℃（冷却）37℃0℃碘液1滴（冷却）1滴1滴现象
3.观察pH对酶促反应速度的影响
（1）配制一系列pH不等的缓冲液。
试剂(ml)1230.2mmol/L磷酸氢二钠5.157.729.720.1mmol/L柠檬酸4.852.280.28pH5.006.808.00
（2）取试管3支，编号1,2,3，按下表操作：
试剂(ml)123唾液222缓冲液3（pH5.00）3（pH6.80）3（pH8.00）1%淀粉22237℃水浴10min碘液1滴1滴1滴现象
4观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响
取试管4支，编号1,2,3,4，按下表操作：
试剂滴12341%淀粉20202020唾液10101010蒸馏水6———1％氯化钠—6——1％硫酸铜——6—1％硫酸钠———637℃水浴5—10min碘液1滴1滴1滴1滴现象
实验结果及分析
思考题
影响酶促反应速度的因素有哪些？它们如何影响酶的活性？