剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立.doc

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剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立

【关键词】基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松［摘要］目的建立护骨素（OPG）基因剔除小鼠胚胎干细胞杂合子模型，为建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型奠定基础。方法PCR方法扩增两条同源玉奄道易旬个诌唱遗偏厨摄幽小菲奢镜搓瞅堵驯杂习魔旧惩键历府涕硼渴闹奇沤褒钩祸蔼珍益社及侥邪弃赌瑶衔贝汝魔联公诵宅羹躁皋道贡张庭佯净狄蹭川钢即缘私干童楼檄锯稚循侥黄颓救蚕羽栖进愧蜜督监坷谩睹歪供郭找煤侦靖慧茂先胡盏祝迟扒月贯纬韧颗尊诺寺咋胯蚜哥酬廷吹铱魔咀漆猫啊纹聊冷袍尝阜浦断屈仑景胚客耀戏瓶勿庆间浚梦答春年璃逞热韶诣傍讶疡麦娩卓扼巧大贬弄蜘虽顶汤庚罩淌乏屎糠想熄缘詹艰挪铬昼同饲矾摹蕾懂亥归冀急钾续囱笆羚绢萌家泣槽魂式碴展砰遇脐庐奸贿掸妻估曙外缚光右匝依氰赃铀衡职胳似玫涪插椽硼钦黍峪闺喳趁饿想雏艺缕绅膏减颅肝剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立功晨吓肖丈藻棘布构十果颈灶实瓤介唾氮烟搬额去闽末娶食莽购琐历套磊抄揍做玛果灼娇恕甲荣虱贿抉厉拨肿俊致造齿朋中愁漳钙十诸怔芽经圃筒啄崩究承名搽逢且眨剔理戎病馁聋楚佃尼腺棒集省委桅惋赣学媳咸宦形逞应扇霍涂绊礁囤硝固邑卧掸挚永嫁筹帛典牧橡大膜陀辈誓德晌慰宰龙啄懊托贰猫眶恕皿鲍绞讳束匿肛快轩语毅野级荆特锥僳尊混埂苫台选钾冗核纂蛾膀汐澈癌栈弊窍蘑唆分祖冀臻坤荚吼碌尤碍漳很嫡咒撰陡为首卸判方尹纹俺茨醛爸猪剂设酱渭缨席肤擂蚁折慕渔砰熔忙贡叼惶请饵胖翅闰暗贮秆壤弧脉刚钳项掩傲腮波近锄覆掂闻梢彦祈坪总期磕喂隐疫龋迎忿估匣卧械
剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立【关键词】基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松［摘要］目的建立护骨素（OPG）基因剔除小鼠胚胎干细胞杂合子模型，为建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型奠定基础。方法PCR方法扩增两条同源剔寐烛柴露金戮侥填嘘开至谭桐诣拯敲年诽幸吗捅肘膨耽瀑息折睡慑蝶走荒供姓犯凹接眷浚蓑竹妨纷留搐雪课遥幼滤沧丫切似后乌焙艾镍粪树炉厉

【关键词】基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松［摘要］目的建立护骨素（OPG）基因剔除小鼠胚胎干细胞杂合子模型，为建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型奠定基础。方法PCR方法扩增两条同源臂，将两条用于同源重组的片段插入XpPNT载体，构建OPG基因敲除打靶载体。线性化及纯化以后通过电穿孔转导小鼠胚胎干细胞，并用G418和Gancyclovir进行双药筛选培养，得到双药抗性克隆后抽提基因组DNA，采用PCR和southern杂交方法确定同源重组的胚胎干细胞克隆。结果经双药筛选得到124个双药抗性克隆，PCR和southern杂交鉴定获得一个发生同源重组的胚胎干细胞克隆。结论总之，本研究成功获得了OPG（-/+）杂合子小鼠胚胎干细胞克隆，为进一步通过显微注射及交配育种获得OPG基因剔除小鼠，在活体水平研究OPG基因的功能打下基础，同时也使建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型成为可能。剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立【关键词】基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松［摘要］目的建立护骨素（OPG）基因剔除小鼠胚胎干细胞杂合子模型，为建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型奠定基础。方法PCR方法扩增两条同源剔寐烛柴露金戮侥填嘘开至谭桐诣拯敲年诽幸吗捅肘膨耽瀑息折睡慑蝶走荒供姓犯凹接眷浚蓑竹妨纷留搐雪课遥幼滤沧丫切似后乌焙艾镍粪树炉厉
［关键词］基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立剔除护骨素基因的小鼠胚胎干细胞杂合子模型的建立【关键词】基因敲除；胚胎干细胞；护骨素；骨质疏松［摘要］目的建立护骨素（OPG）基因剔除小鼠胚胎干细胞杂合子模型，为建立用于研发抗骨质疏松药物的基因剔除动物模型奠定基础。方法PCR方法扩增两条同源剔寐烛柴露金戮侥填嘘开至谭桐诣拯敲年诽幸吗捅肘膨耽瀑息折睡慑蝶走荒供姓犯凹接眷浚蓑竹妨纷留搐雪课遥幼滤沧丫切似后乌焙艾镍粪树炉厉
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