地黄炮制机理.doc

地黄经过不同的炮制方法加工后,其性味、功效也会发生相应的改变。鲜地黄。。。鲜地黄经产地加工焙干后名干地黄或生地黄,其。。。干地黄经蒸制后名熟地黄,其性由寒转温,其味由苦转甘,其功效由清转补,以滋阴补血、益精填髓为主。现代药理研究表明，地黄生品具有免疫调节、抗衰老、降血糖等作用，而熟地黄对肾衰竭大鼠具有保护作用，还具有抗抑郁、抗炎及抗疲劳作用，炮制品可以增强红细胞变形性和红细胞中ATP水平，抑制红细胞聚
集，激活纤溶酶系统，而生品没有上述活性。

熟地黄质厚味浓,滋腻碍脾,酒制以补阴血,可借酒力行散,起到行药势,通血脉的作用。蒸制地黄，传统采用常压下长时间加热的方法，既费时费工，又消耗大量能源；而现在采用加压的方法短时间蒸制，且炮制品的质量和传统工艺无显著差别。另一方面，传统炮制熟地黄采用鲜地黄或生地黄，也没有说明酒的种类和比例。而药典2010年版一部规定：“每100kg生地黄，用黄酒30～50kg”。药典2010年版定为法定方法，这种方法的特点就是长时间蒸晒。但是，在一些细节问题上并未作详细说明，如蒸多长时间为好？常压蒸还是加压蒸？蒸后的成品以感官定性判断合格是否准确.不同炮制方法对熟地黄的临床使用的影响？这些问题在《中国药典》2010年版均没有相应的规定，所以值得进一步研究。

梓醇含量和5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量相关性进行研究,发现随着蒸制次数的增加,梓醇的含量减少,5-HMF的含量增加;梓醇的减少与5-HMF的增加呈现对应趋势,即梓醇的减少幅度越大,5-HMF的增加幅度越大,推测梓醇在加热过程中一部分转化为了5-HMF,这种转化在一定时间范围内随着时间的延长而增加,但蒸制时间过长则含量逐步下降,可能是由于长时间水蒸气加热而损失,或5-羟甲基糠醛进一步分解之故
地黄中糖类化合物主要包括多糖和寡糖。药理实验表明地黄多糖具有免疫和抑瘤活性并对心血管系统有强心、降压、保护心肌、抑制血栓形成和降血脂等作用，可见地黄多糖是地黄的重要活性成分。对地黄不同炮制品中多糖含量的研究表明，熟地黄粗多糖中总粗含量较生地黄偏低，推测熟地黄总多糖含量低的原因有二,一是生地黄在蒸制过程中,水溶性多糖有可能随水气溶解而流失;二是在蒸制过程中,可能有部分多糖水解成单糖和低聚糖，且熟地黄粗多糖的提取率明显高于生地黄。通过对地黄炮制前后还原糖含量的测定也表明,虽然炮制后熟地黄多糖含量降低,但还原糖含量却增加了,而且熟地黄在清蒸和酒炖过程中,还原糖含量在一定时间范围内随着清蒸和酒炖时间的延长而增加。据文献报道地黄寡糖为混合物，生地黄中含量最高的四糖是水苏糖，三糖可能为棉子糖和甘露三糖，其他糖类还有毛蕊糖、蔗糖、半乳糖、葡萄糖和果糖。加工炮制过程中，水苏糖含量大幅度下降，而主要寡糖变成甘露三糖，同时葡萄糖和果糖亦明显增加。更进一步的研究显示，在鲜地黄烘焙过程中，水苏糖以脱半乳糖为主，在生地黄蒸制过程中，以脱果糖为主。
梓醇具有缓泻作用,因而是生地黄表现凉性的主要成分之一。5-HMF可增加红细胞在毛细血管中流动时的变形性,提高红细胞的通过能力,因而具有活血、补血的作用,是熟地黄表现温性的活性成分之一。由此可见熟地黄加工过程中梓醇减少,5-HMF含量上升是地黄熟化过程中药性由寒性转变为温性的主要原因之一。已有研究证明生地黄中另一表现寒性的成分水苏糖(含半乳糖苷键,不易被消化吸收,从而导致肠道微生物利用其快速繁殖,引起腹泻)在熟地黄蒸制过程中分解为半乳糖、葡萄糖、果糖等,而这些单糖及其他来源的单糖在高温下可部分转变为5-HMF,这是熟地黄甜味增加药性转变为温性的另一原因。

传统确定熟地黄炮制终点方法主要靠手摸、目测、品尝等感官分析，这种宽范围的感官标准给具体操作带来困难，导致熟地黄的质量参差不齐，严重影响临床疗效，且不利于炮制中药的现代化与标准化。因此，建立一个科学的、客观的评价熟地黄炮制终点的方法迫在眉睫，并成为地黄研究的热点。
选取各样品在205nm下的色谱图作为熟地黄指纹图谱,205nm是05版药典规定的生地黄检测成分梓醇的有效吸收区,此波长下地黄中主要有效成分环烯醚萜苷类、5-HMF、麦角甾苷等苯乙醇苷类均有吸收。熟地黄的色谱图与鲜地黄和生地黄的相比,突出的变化为水苏糖含量相对减少而棉子糖相对增加,葡萄糖和果糖变得十分显著,而梓醇的色谱峰变得不明显。采用HPLC指纹图谱技术检测生地黄炮制成熟地黄过程中主要活性成分变化，并通过与标准熟地黄指纹图谱的比较寻找最佳加工时间。结果显示，在炮制过程中梓醇快速下降至几乎消失，5-HMF呈直线上升趋势，而麦角甾苷变化不明显，生地黄在蒸制26h后所制样品与标准熟地黄相似性最大，因此26h是熟地黄清蒸的最佳时间。熟地黄加工过程中随着清蒸时间延长,采样指纹与熟地黄标准指纹相似性距离系数减小,清蒸26h与熟地黄标准指纹相似