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姓名:杞正富学号:20120322213班级:12级生物二班 实验二果蝇单因子遗传实验 一、目的: 1、学会饲养果蝇,掌握果蝇的杂交方法 2、验证分离规律原理 3、学会统计学方法处理实验数据 二、原理 决定相对性状的一对等位基因同时存在于杂种一代(F1)的个体中,但仍维持它们各自的个体性,在配子形成时互相分开,分别进入一个配子细胞中去。在孟德尔定律中最根本的就是分离定律。比较普遍的说法是:在结合子中相同染色体上占有同一基因座位的来自双亲的二个基因决不会发生融合而仍维持其个体性,而在配子形成时,基因发生分离,其结果是杂种第二代(F2)和回交一代(B1)中性状会发生分离。分离定律的实质是指位于一对同源染色体上的一对等位基因在配子形成过程中,彼此分离,互不干扰,各自独立的分配到不同的配子中去,每个配子中只含有一对基因中的一个成员,对本次实验的真实性可以采用不同的方法进行验证。 果蝇的单因子遗传是指常染色体上一对等位基因的传递规律。由于显隐关系,在子代只表现显性性状,但基因型是杂合状态。当子一代形成配子时,基因保持相对独立,又按原样分配到不同的配子中去。雌雄配子结合的概率相等,子二代的基因型就有3种,比例是1:2:1,而表型是3:1。 三、材料与方法 1、材料 黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)品系 2方法 1)、果蝇饲养 实验用长翅果蝇比腹部末端长约身体长度的1/4左右,长翅是显性。残翅果蝇几乎没有翅膀,只有一个很小的棒状残痕,无飞翔能力,残翅对长翅是隐性等位基因。实验前要分别饲养这2种果蝇,待化蛹之后,去掉饲养瓶中果蝇,准备从新羽化的果蝇中挑选处女蝇作杂交亲本。 2)、选择处女蝇 从羽化不足10h的果蝇中挑选雌性果蝇做母本,长翅、残翅分别可以作母本。处女蝇选择的数目根据实验需要而定,一般每个培养瓶中放3~5对。 3)、果蝇的杂交 将选择的处女蝇放入培养瓶内,确认无误后,再选择相对性状雄性做父本。为了验证长翅对残翅是显性,可以分别用长翅和残翅作母本,也就是正反交各做一瓶,即: 长翅(雌)*残翅(雄) 残翅(雌)*长翅(雄) 亲本果蝇全部放入以后,要在杂交瓶上贴上标签,表明杂交用亲本,杂交日期及实验人姓名。杂交果蝇要放在23度恒温箱中培养。如果室温能达到果蝇生活需要的温度,也可以在室温条件下饲养。 4)、取亲本 亲本果蝇都是正常生活状态时,约7~8天培养瓶中会出现幼虫和蛹,这时必须将亲本的母体剔除防止与F1代回交。 5)、F1代自交 F1代果蝇羽化以后,无论正反交表型性状都应该是长翅。在细观察F1代果蝇确实与理论相符,可直接将F1代果蝇转入一个新的培养瓶中5~8对,这里就不再挑选处女蝇了。 6)、再取亲本 F1代果蝇自交7~8天,在记录F2代果蝇是要认真细致,统计的结果填入表中。 四.结果与分析 表1.F2代果蝇 观察结果 统计 数据长翅(雌)*残翅(雄)长翅数残翅数2014/4/1442132014/4/18112282014/4/2315040合计304818)、实验结果检测 统计的结果是否符合理论值,要用卡平方检验才能证明。卡平方用表示:计算方法: 表2检测: 长翅(+)残翅(vg)合计实验观察数(O)30481385预期数(C)28897385偏差(O-C)1616320.892.673.56P0.5~1.00.5~1.0由图2计算结果查卡平方,P>0.05说明符合一对基因分离规律的假说.实验结果与预期结果相符,实验成功。 根据以上实验结果并对其进行分析后可得到如下结果: 1.果蝇的长翅与残翅是位于常染色体上的一对等位基因,并且长翅是受显性基因控制的,为显性,而残翅则是受隐性基因控制的,为隐性。 2.常染色体上的遗传其正交和反交的结果是一致的,并不受到性别的决定。 3.用长翅果蝇与残翅果蝇进行交配,配子分离比为1:1,子一代雌雄个体间相互交配,子二代基因型分离比为1:2:1,显性完全时,子二代表型分离比是3:1. 由正交结果进行卡平方测验结果可知0.8<P<0.9,长翅数与残翅数的比值接近3:1,由反交结果进行卡平方测验结果可知0.3<P<0.5,长翅数与残翅数的比值也接近3:1,由此可以确定果蝇的长翅与残翅这一相对性状是位于常染色体上的一对等位基因,这对基因在杂合状态中保持相对的独立性,而在配子形成时,又按原样分离到不同的配子中去,导致子二代的表性比为3:1.同时也可以确定长翅是受显性基因控制的,而残翅则是受隐性基因控制的。 将正反交合并后进行卡平方测验可知0.3<P<0.5,同样符合孟德尔的分离比例,只是合并后的概率比没有合并后的要小,说明正交与反交之间存在一定的差异,但明显看出这个差异不是很大,存在差异的原因是由许多因素造成的,如温度,大气压,人为因素等等。我认为最主要的因素则应该是果蝇本身。