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中国卫生检验杂志2010年6月第20卷第6期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Jun2010;Vol20No61391 【微生物检测方法】 结核分枝杆菌异烟肼耐药基因KatG分析 梅建华,雷永良,王晓光3,陈秀英 (浙江省丽水市疾病预防控制中心,浙江丽水323000) [摘要]目的:了解丽水地区结核分枝杆菌耐INH分离株KatG基因突变情况。方法:采用PCR-DNA直接测序法对48 株结核分枝杆菌临床分离株KatG基因与耐INH关系密切的突变位点进行分析。结果:药敏试验共获得INH耐药结核菌 12株,INH敏感结核菌36株,耐药株占25100%(12/48);KatG基因第315位和第463位未见碱基的插入或缺失,其中有 37株存在点突变,突变率为77108%,有9株发生在S315:AGC→ACC(Ser→Thr),均为INH耐药菌株;有37株发生在 R463:CGG→CTG(Arg→Leu),其中有9株为INH耐药菌株,28株为INH敏感菌株;S315和R463同时发生突变的有9 株,均为INH耐药菌株;有11株均未发生突变,其中3株为INH耐药菌株。结论:丽水地区部分结核分枝杆菌耐INH是 由于其KatG基因耐药位点(尤其是S315)突变所致,与药敏试验吻合率为100%;KatG基因R463/L突变无意义;有3株 药敏试验耐药菌未发现S315和/或R463耐药位点突变,可能还存在其它耐药机制,需要进一步研究证实。 [关键词]结核分枝杆菌;异烟肼;KatG基因;耐药 [中图分类号]R378191+1[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(2010)06-1391-03 DetectionofKatGgenerelatedwithisoniazid-resistanceinMycobacteriumtuberculosis MEIJian2hua,LEIYong2liang,WANGXiao2guang3,CHENXiu2ying (LishuiCenterforDiseaseControlandPrevention,Lishui323000,China) [Abstract]Objective:ToobservethemutationsofKatGgeneinisoniazid-resistantMycobacteriumtuberculosis(MTB)strains fromLishuicity1Methods:AnalyzingmutationsofKatGgenein48clinicalisolatesofMTBbyPCR-DNA1Results:INHsuscep2 tibilitytestingwereobtained12isolatesofdrug-resistantMTB,INH-sensitiveMTB36,drug-resistantstrainsaccountedfor 25100%(12/48)1Noinsertionordeletionmutationwasfoundinthesespecimens77108%(37/48)rclinicalisolateshadkatG mutationinS315andR463coderegion9isolateshadAGCtoACCmutationsatcodonS315;37isolateshadCGGtoCTGmuta2 tionsatcodonR463;9isolateshadmutationsbothatcodonS315andR463,thereare3isolatesnomutations occurred1Conclusion:INHresistanceinsomeMTBisolateswereduetomutationsonKatGgeneswasfrequentlyobservedusually situatedincodonS315inLishuicity,withthesensitivitytestmatchratewas100%1NonsensemutationinKatGgeneR463/ L1INHresistancewasrelatedwithspotmutationofKatGgeneinMTB,butothermechanismsmayneedbeexplored1 [Keywords]Mycobacteriumtuberculosis;KetG;Drug-resistancegene;Isoniazid 近几年来,由于结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,仅是KatG基因的完全缺失,点突变、碱基的插入和缺失同样 MTB