IL-12体外促进慢性乙型肝炎患者PBMC+IFN-γ的产生.pdf

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儿．12体外促进慢性乙型肝炎患者PBMCBing—Liang，聊Chang—You．Department·临床免疫学·IFN．Y的产生①PBMCpromotesimmunityfrom1材料与方法熊仕秋刘惠平⑦高翔③林炳亮固吴长有(中山大学基础医学院免疫学教研室，广州510089)B订rUSHui一只增，GAOUniversity，Guangzhou目前，全球乙型肝炎病毒慢性感染的人数超过了3．5亿，35％一40％的慢性乙型肝炎终将转化为肝硬化或肝癌。每年由乙肝病毒引起的死亡人数超过一百万⋯。而中国是乙型病毒性肝炎的高发区，保守估计的乙肝感染人数占全国人口的10％以上。HBV急性感染时，机体会发生细胞和体液免疫应答，其中最主要的是由CD8+T和Thl细胞介导的免疫反应，可直接杀伤被病毒感染的细胞或通过分泌的IFN一-y等细胞因子抑制病毒复制；但是在慢性感染者体内，出现细胞免疫反应低下或免疫耐受，所以不能清除病毒(2】。IL一12是由抗原提呈细胞所分泌的一种细胞因子，其主要的生物学功能是诱导nl细胞的分化、增加CD8+T细胞的细胞毒活性，同时增强NK细胞的功能，因此促进细胞免疫功能H’。为了进一步探讨IL—12是否可以逆转慢性乙肝患者的细胞免疫功能，本实验拟体外观测重组IL一12对慢性乙肝患者细胞免疫功能的影响，从而为临床应用免疫调节剂治疗慢性乙型肝炎提供新的思路。1．1材料1．1．1试剂重组人自细胞介素12(rhIL一12)、EusPOT试剂盒、鼠抗人IFN一1单克隆抗体、荧光标记的抗CD4、CD8及IFN一7抗体和同型对照【摘要]IL。12thecellularofpatients、订thchronichepa-fitisinfectioninvitroShi—Qiu，LIUIL一12．髓e中国图书分类号R392文献标识码A文章编号1000-484X(2006)05-0473-05目的：探讨体外IL．12对慢性乙型病毒性肝炎患者细胞免疫功能的影响，为临床治疗慢性乙型病毒性肝炎提供理论依据。方法：慢性乙型肝炎患者PBMCs与HBsAg、HBsAg+1L．12、HBeAg或HBcAg+几一12孵育后，利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清中IFN．1的含量；用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)在单个细胞水平上检测PBMCs中IFN一7产生细胞的频率；用流式细胞记数仪(FACS)检测PBMCs中IFN-1+的细胞亚群。结果：当乙肝患者PBMCs与HBsAg或HBcAg孵育后，只有少数病例发生反应，产生低水平的IFN一1。．当IL一12加入细胞培养后，能显著地增加HBsAg或HBeAg诱导IFN一7的产生；分泌IFN。1的细胞频率显著增加；IFN．1+的细胞主要包括CD8+T细胞和非T细胞。结论：IL-12体外能增强慢性乙型肝炎患者的细胞免疫应答。【关键词]白细胞介素12；慢性乙型病毒性肝炎；外周血单个核细胞；细胞免疫Medical[Abstract]Objective：Todisease．Methods：PBMCSsupematants，theceils，andresultedbyCanresponse[Keywords]ILL一12；HBV；PBMC；Cellular①本课题受国家重点基础研究发展规划973项目(2001CB510007)②中国人民解放军458医院全军肝病中心，广州510600，为同等贡③中山大学第一附属医院消化内科，广州510089④中山大学第三附属医院传染科，广髑510630通讯作者及课题主持人：吴长有，E—mail：[e-mail]。XIONGXiang，LINImmunology，ZhongshanSchool，Zhongshan510089，ChinadetermineeeUularwithinfection，andprovideinformationtherapypreparedperipheralabsencewithoutsubpopulationducingdetectedEUSA，EUSPOTFAcS．Results：Lessthan30％patientsandPBMCsstimulatedalone．AdditionculturesIFN一1一producingaddition，IL-12IFN一1populations．Conclusion：IL-12promotehepatitisenhance-IFN-1produetion．和中山大学“百人计划”启动基金资助献作者作者简介：熊仕秋(1971年一)，男，在职博士；effectIL-12immunepatientsBvirusbasicscientificforclinicthisbl