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·106·中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第43卷第1期2012年1月 七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的机制研究 * 万贵平,张真真,蔡雪婷,卢悟广,曹鹏 江苏省中医药研究院细胞与分子生物学实验室,江苏南京210028 摘要:目的研究七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的作用及其机制。方法MTT法分析七叶皂苷钠对Jurkat细 胞增殖的抑制作用,Hoechst33258染色、FITC-AnnexinV/PI双染、DNALadder、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期, Westernblotting法分析凋亡相关蛋白变化。结果七叶皂苷钠呈质量浓度和时间相关方式抑制Jurkat细胞增殖;经七叶皂苷 钠处理后的Jurkat细胞出现凋亡的形态学特征、DNA条带,AnnexinV+/PI−细胞(早期凋亡细胞)显著增加;七叶皂苷钠可 活化Jurkat细胞中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3,引起PARP的切割,并减少Bcl-2蛋白的表达。结论七叶皂苷钠能 有效地通过诱导细胞凋亡抑制Jurkat细胞增殖。 关键词:七叶皂苷钠;白血病Jurkat细胞;细胞凋亡;细胞增殖;抗肿瘤 中图分类号:R282.710.5文献标志码:A文章编号:0253-2670(2012)01-0106-05 MechanismofescinsodiumininhibitionofhumanleukemiaJurkatcells proliferation WANGui-ping,ZHANGZhen-zhen,CAIXue-ting,LUWu-guang,CAOPeng LaboratoryofCellularandMolecularBiology,JiangsuProvinceAcacemyofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210028,China Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofescinsodiumonproliferationofhumanleukemiaJurkatcellsanditspossible mechanism.MethodsThereductionofcellularviabilitywasdeterminedbyMTTassay.Hoechst33258staining,DNAfragmentation assay,FITC-AnnexinV-FITC/PIstainingassay,andcytometricanalysiswereusedtoconfirmthefeaturesofapoptosisandcellcycle. Westernblottingassayswereperformedtoexploretheapoptoticpathway.ResultsEscinsodiuminhibitedtheproliferationofJurkat cellsinbothdose-andtime-dependentmanners.Themorphologicalapoptosis,DNAfragmentationpattern,andthepercentageof AnnexinV+/PI−(earlyapoptosis)cellsweremarkedlyincreasedinescinsodium-treatedJurkatcells.Escinsodiumactivated Caspase-8,Caspase-9,andCaspase-3,degradedpoly(ADP-ribose)polymerase(PARP),andattenuatedBcl-2expression.Conclusion EscinsodiumcouldinhibittheproliferationofJurkatcellsviatheinductionofapoptosiseffectively. Keywords:escinsodium;leukemiaJurkatcells;apoptosis;cellproliferation;antitumor 细胞凋亡的缺失在肿瘤发生、发展过程中起重但关于七叶皂苷钠抗肿瘤作用的报道较少[5],而抑 要作用,并影响肿瘤转移及预后。肿瘤细胞逃避凋制人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖的作用 亡的能力在其对常规治疗药物产生抗药性中发挥重更是鲜见报道。因此,本实验研究了七叶皂苷钠对 要作用。因此,选择性地诱导肿瘤细胞凋亡已成为Jurkat细胞增殖的抑制作用及其机制,为将七叶皂 抗肿瘤药物研发的一个重要策略[1-3]。苷钠开发成为抗