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CHEMICALANALYSISANDMETERAGE 第22卷,第3期2013年5月 Vol.22,No.3 May2013 100 doi:10.3969/j.issn.10086145.2013.03.029 黄曲霉毒素检测方法研究进展 黄洁 (中国人民解放军总后勤部司令部管理保障局第二门诊部,北京100071 摘要对黄曲霉毒素的检测方法薄层色谱、高效液相色谱、免疫学与仪器联 用、超光谱等分析方法进行了综述,评述了上述方法的优劣、适用条件和最新进 展。 关键词黄曲霉毒素;检测方法;超光谱法;研究进展 中图分类号:O656.3文献标识码:A文章编号:1008–6145(201303–0100–05 ResearchProgressinDetectingMethodsofAflatoxins HuangJie (No.2Clinic,ManagementSupportBureau,GeneralLogisticsDepartment,Beijing 100071,China AflatoxindetectingmethodswerereviewedsuchasTCL,HPLC, immunologyandinstrumentationassociation,hyperspectraldetectionmethods,thepros andconsoftheabovemethods,theapplicableconditionsandthelatestprogresswere reviewed. Keywordsmethods;hyperspectraldetectionmethods; researchprogress在当今社会,食品安全越来越受到人们的关注和重视,尤其是在发生 三聚氰胺和地沟油等一系列事件之后,人们更加重视食品安全问题。黄曲霉毒素这 类真菌在世界不同地区都发现大量存在于食品中,它主要是由黄曲霉和寄生曲霉等 真菌产生的一类有毒次生代谢物[1–2]。目前已知的黄曲霉毒素及其衍生物有20余 种,即B1,B2,B2a,G1,G2,G2a,M1,M2等,黄曲霉毒素B1是其中毒性最大的一种,实验 结果显示,其毒性是人们熟知的剧毒药氰化钾的10倍,是砒霜的68倍。黄曲霉毒素 B1可诱发癌症和皮下肉瘤,并且可使动物的肝、肾、大脑和神经系统等产生病变。 自20世纪60年代以来,有关黄曲霉毒素的危害被大量报道,以致黄曲霉毒素已成为 最受人们关注的一种真菌毒素[3]。因此,寻求准确、快速、简便、价廉的检测方法, 对黄曲霉毒素进行高效的定性定量分析,是黄曲霉毒素研究的一个重要方面。以下 对黄曲霉毒素的检测方法研究进展进行评述。1薄层色谱法 1.1薄层层析(TLC法 TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法,在薄层板展开后,在365nm紫外灯下,黄 曲霉毒素B1,B2,G1和G2分别显示紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光。TLC法的特 异性较差,灵敏度相对较差,且测定黄曲霉毒素专一性不够,经常引起测量误差。但由 于此法设备简单,易于普及,所以国内外仍在使用。 1.2高效薄层(HPTLC法 HPTLC法[4–5]测定黄曲霉毒素采用目前国际上流行的 固相萃取法中针对真菌和病毒的多功能净化(MFC 柱。采用MFC柱净化后,仅用单相展开即可达到分离测定的目的,不仅节省了工作 时间,提高了工作效率,而且进一步减少了有毒有害溶剂的用量。 Stroka等[6]将免疫亲合柱净化应用于TLC法测定,进行单相展开并用荧光密度 计定量,此方法能检测含量明显低于当前欧盟标准的黄曲霉毒素。Kamimura等[7]用 HPTLC方法测定玉米、花生、荞麦等样品,并与通过公职分析化学家协会(AOAC 认证的分析花生及花生制品中黄曲霉素的官方方法CB(ContaminationBranch法和 BF(BestFoods法进行比较,4种主要黄曲霉毒素的检测限均不高于0.2μg/kg,回收 率与CB法一样均高于BF法。1.3高压薄层色谱(OPTLC法 高压薄层色谱于1979年由Tyihak提出[8] ,它结合了经典薄层色谱法、高效薄层色谱法与高效液相色谱法的优点,是一种 能够提高薄层分离效率的平面液相色谱技术。随着实验技术的不断成熟,OPTLC法 在饲料和食物中黄曲霉毒素的检测方面的应用越来越多。EszterPapp等[9]发展了 一系列适合检测玉米和小麦中黄曲霉毒素的OPTLC方法。2高效液相色谱 (HPLC法 由于具有稳定、准确、灵敏等优点,HPLC法已成为当前进行黄曲霉毒素定量 研究的首选方法。 分析黄曲霉毒素的液相色谱方法包括正相液相色谱方 联系人:黄洁;E-mail:hjeileen@126.com收稿日期:2013–0