用基因芯片研究尼古丁对肺腺癌细胞凋亡基因表达的影响.pdf

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用基因芯片研究尼古丁对肺腺癌细胞凋亡基因表达的影响manadenocarcinomamicroarray材料和方法谢佐福1，卢袁丁1，周冬梅2，林声2Effectofnicotineinvitroexpressionsapoptosis--relatedby吸烟是肺癌发生的重要原因，而尼古丁是香烟中的重要成分，是引起吸烟者成瘾的罪魁祸首，在烟民的血液中含量高达90—lmol／L。近年来，已有实验表明，尼古丁不仅能收缩血管，损伤血管内皮细胞，上调血管内皮细胞生长因子表达，而且还能抑制肿瘤细胞凋亡，促进小细胞肺癌细胞NCI—H446株和其它肿瘤细胞的生长，显著影响NCI—H446株凋亡相关基因表达¨。3J。本研究采用M33'法和基因芯片技术观察尼古丁对人体外肺腺癌细胞生长及凋亡基因表达的影响。细胞培养以及尼古丁处理SPC—A一1细胞由第三军医大学附属新桥医院[文章编号]1000—4718(2007)05-0968—04郑天荣2，林2，(1福建中医学院中西医结合系生理教研室，2福建省肿瘤医院免疫病理研究室，福建福州350003)[摘要]目的：探讨尼古丁对人肺癌细胞生长的影响及其机制。方法：采用MTT法分析尼古丁处理人肺腺癌细胞SPC—A后生长变化；采用基因芯片技术检测尼古丁处理SPC—A一1细胞前后，细胞凋亡相关基因表达的变化。结果：尼古丁对SPC—A细胞的生长具有显著的促进作用，但随着尼古丁浓度的增大，促进作用也下降。100斗∥L尼古丁处理后，SPC—A一1细胞451个凋亡相关基因中有显著变化的基因有80个，其中，促进凋亡相关基因上调的有29个，下调的有13个；抑制凋亡相关基因上调的有26个，下调的有12个。结论：尼古丁能促进人肺腺癌细胞生长，调节许多凋亡相关基因表达。[关键词]尼古丁；细胞凋亡；肺肿瘤[中图分类号】[文献标识码]geneshu·-lungcellscDNADin91，ZHOUShen92College，2Department[ABSTRACT][KEYWORDS][收稿日期]2006—04—06[修回日期]2006—06—28XIEZuo—ful，ZHENGTian—ron92，LULin2，YUANDong—mel～，LIN(1DepartmentofPhysiology，FujianofImmunology，Fujian350003，China．E—mail：[e-mail])AIM：Togene．METHODS：Lungconcentrations(1—1000斗g／L)of100斗g／Lnicotine(1—10斗g／L)wasly(CY3／CY5>2．0)，anddown—regulated(CY3／CY5<0．5)．CONCLUSIoN：Nicotineregulating·968·R363onTraditionalChineseMedicalProvincialHospital，Fuzhougrowthhumanadenocarnomaandapoptosis—relatedline，SPC—A一1，wasculturedthefor48appliedevaluateeffectSPC—A一1cellline．Aftertreatedwithhoum，cDNAprofileuseddetect45line．RESULTS：Signif-proliferationobserved，butdecreasedculture．Growthinhibition000斗g／L27％，一40％，一40％and一93％．Microarraydetectionshowedthatsignificantlydifferentappeared80451genes．29apoptosis—promoted26apoptosis—inhibitedup—regulated25throughneoplasms000Tel：0591—83637382：E—mail：[e-mail]·concentration1，10，100，1significant—maypromotemanygeneexpressions．Nicotine；Apoptosis；Lungwastowererateva—crease
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测定A：叭A，，。、A。，。。定量结全军呼吸内科中心提供。细胞在含有15％的小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)和青霉素10’U／L、链霉素100养液(Hyclone)中，置于37oC、5％CO：和饱和湿度的孵育箱中培养。尼古丁购于Sigma。细