补骨脂药材的HPLC指纹图谱研究.pdf

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补骨脂药材的HPLC指纹图谱研究①’‘’’‘‘‘’’’””””””。”。”，。。矗’I-94揣。4。”’’’’”“舒时-。川·。’””。”’”-·”I关键词】补骨脂肿Lc指纹图谱40KHZ)1watemanO．45mm滤膜。张羽孟宪生(辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600)【摘要】目的建立补骨脂药材的高效液相色谱指纹图谱，为其采收、生产，质量控制提供依据。方法以补骨脂素、异补骨脂素为对照，采用HPI上梯度洗脱的方法建立补骨脂药材的指纹图谱。结果建立了补骨脂药材的HPLc指纹图谱，标定了15个共有峰，10批补骨脂药材的相似度高于o．950。结论建立的指纹图谱的方法精密度．重现性和稳定性良好。【中图分类号】R鹞3【文献标识码】凡【文章编号】1672—5654(20n)02(b卜帅14川l1仪器与试剂HPLC高效液相色谱仪(包括GlDAD二极管阵列检测器，G1312A低压二元泵，柱温箱，Chemstation化学工作站等)，AlltechC18色谱柱(4．6mm×250mm，5mm)，Synthesis超纯水纯化系统(millipore，法国)，BSllos型Sartorius万分之一天平(德国赛多利斯科学仪器有限公司)；KQ一500犁超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，功率500w，频率乙腈(色谱纯，Merck)，甲醇(色谱纯，J．Baker)、甲酸，乙酸、磷酸(北京第二化工厂，分析纯)、超纯水(自制)。十批药材由江西某公司提供。补骨脂素(批号l10739—200814)、异补骨脂素(批号110738—200309)标准品均购于中国药品生物制品检定所。2方法与结果2．1色谱条件C18色谱柱(4．6mm×250mm，5mm)，流动相：A0．1％甲酸一水，B乙腈；梯度洗脱：O～20吻insB，保持5min}流速：1．0mL／minI柱温：30℃I检测波长：254nm。分析时间：60min。2．2供试品溶液的制备精密称取补骨脂药材粉末1．09，加入适量70％乙醇浸泡过夜，超声提取O．5h，用70％定容至25mL，摇匀，用0．45mm滤膜过滤，即得。2．3标准品溶液的制备取补骨脂素和异补骨脂素标准品各5．0mg，分别加甲醇定容至25mL，作为标准品旷备液，混合稀释后即为混合标准品HPLC指纹图谱方法学考察精密度试验取同一批次补骨脂药材粉末，按“2．2”项下方法制备供试品溶液，连续进样6次，记录每个图谱共有峰的保留时间和峰面积。经计算得出各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3．O％，表明本实验建立的方法精密度好。稳定性试验取同一批次补骨脂药材粉末，按“2．2”项下方法制备供试品溶液，分别在02’43J2h24h进样6次，记录每个图谱共有峰的保留时间和峰面积。经计算得出各共有峰相时保留时间RsD值<3．O％，相对峰面积的RSD值<3．0％，表明供试品在24h内稳定。重复性试验分别取同意批补骨脂药材粉末6份，按“2．2”项l：方法制备供试品溶液，分别进样，进样量为L，记录每个图谱共有峰的保留时间和峰面积。经计算得出各共有峰相对保留时间与相对峰面积RSD值均<3．0％，表明该方法重复性良好。补骨脂药材指纹图谱的建立与相似度分析指纹图谱的建立及共有指纹峰的标定按“2．2”项下方法制备lO批次补骨脂药材的供试品溶液，分别进20lO批供试品溶液和标准品混合溶液，比较10批供试品HPLC色谱图的检测结果，选定其中15个共有的色谱峰为共有指纹峰，建立补骨脂药材的HPLC指纹图谱。2．5．2相似度分析将lO批补骨脂药材的实验数据导入国家药典委员会指定的“相似度评价软件”进行数据处理，生成对照指纹图谱，见图1。3讨论中药指纹图谱体现的是中药材中所共有的、具有特异性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。通过这种特异性的图谱能够鉴别药材的真伪或者产地，另外通过指纹谱中特征峰数据(包括含量、比例等)能够有效的控制药材质量。实验建立的补骨脂药材的指纹图谱方法简便、稳定、重复性好，可以为补骨脂药材内在质量控制提供技术基础。参考文献[1】中华人民共和国药典委员会．中国药典一部【S】．北京：中国医药科技出版社，【收稿日期】20”一01一∞①作者简介：张羽：女，1985～：盘锦，辽宁中医药大学学生，硕士，研究方向：中药分析。孟宪生：男，1964～：沈阳，辽宁中医药大学孵化器实验室主任，副教授，研究方向：系统生物学、中药组分配伍及药品质量分析。141．1仪器Milli—Q1．2试剂lO％～19％B，20～25minS19％～30％B。25～55mins30％～90％溶液。图1补骨脂药材对照指纹图谱中国卫生产业·第八卷·第(05一06)期合刊Agilentl200series31585mAlltech2．42．4．12．4．22．4．3202．52．5．1