NK细胞抑制CD34^+早期急性髓系白血病细胞克隆形成.pdf

广东医学2008年1月第29卷第1期GuangdongMedicalJournalJan．2008，Vo1．29，No．I
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NK细胞抑制CD34+早期急性髓系白血病
细胞克隆形成水

牛新清胡亮杉郭坤元周健何颖芝孙明卢小迅
南方医科大学珠江医院血液科(广州510282)

【摘要】目的探讨同种异体NK细胞对CD34早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应。方法免疫磁
珠法分离5例健康个体NK细胞，甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成。同时与
NK杀伤敏感细胞株K562比较。结果急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98．0±1．1)％，分
选后的NK细胞(CD3一CD16CD56细胞)纯度为(93．24-3．7)％。不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均能抑制
其克隆形成。随着效靶比的增高，其克隆抑制率随之增高(P<0．05)。同一效靶比时，NK细胞对KG1a的克隆抑
制率低于K562，差异有显著性(P<0．05)。结论同种异体NK细胞对CD34早期急性髓系白血病细胞的克隆
形成具有一定的抑制作用。
【关键词】NK细胞早期急性髓系白血病细胞克隆抑制

CytotoxicityofaHogeneficNKcellsagainstCD34earlyacutemyelogenousleukemiacellsN／UXin—qing，HU
Liang—shan，GUOKun—yl~n，eta1．DepartmentofHematology，ZhujiangHospital，SouthernMedicalUniversity，Guan—
g抽0“510282，China
【Abstract】ObjectiveTostudytheinvitrocloneinhibitionrateofallogeneticNKcellsonhumanCD34early
acutemyelogenousleukemiacels．MethodsTheexpressionofCD34antigenonacutemyelogenousleukemiacellline—

KGlacellswasdetectedbyFACS．CloneinhibitionrateofNKcelsisolatedfrom5healthypersonswithMACSwasdetec—
tedbycalculationofmethylceluloseatdiferentefect—to—target(E：T)ratioscomparedwithI(562whichissensitiveto
NKcelsResultsTheexpressionrateofCD34antigenonKG1acelswas(98．04-1．1)％andpurifyofisolatedNK
cels(CD3一CD16CD56cels)was(93．24-3．7)％detectedbyFACS．Therewasinvitrocloneinhibitionofalloge—
neticNKcellsagainstKG1acelsatdiferentE：Tratios．WithincreasingE：Tratios．cloneinhibitionrateofallogenetic

NKcelsagainstKG1acelsincreased．WithsalneE：Tratios，cloneinhibitionrateagainstKG1acellswaslowerthan
thatagainstI(562cels(P<0．05)．ConclusionAllogeneticNKcelsdisplayedcloneinhibitionagainstCD34earlya—
cutemyelogenousleukemiacels．
【Keywords】NKcellEarlyacutemyelogenousleukemiaCloneinhibition

同种异体NK细胞治疗白血病的研究越来越引起公司)和NK细胞分离缓冲液(磷酸盐缓冲液，pH7．2，
重视。分离富集NK细胞技术的成熟使NK细胞用于含0．5％BSA和2mmol／LEDTA)，LDH杀伤活性检测
临床成为可能⋯。但有关同种异体NK细胞对早期急试剂盒(CytoTox96Non—RadioactiveCytotoxocityAssay，
性髓系白血病细胞的杀伤尚未见报道。KG1a是人急Promega公司)，流式细胞仪(coulter公司)，FITC标记
性髓系白血病(AML)细胞株KG1的变异体，从形态的CD34抗体(eBioscience公司)，RPMI1640(Gibeo公
学、细胞化学、免疫分型上均处于