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蒌叶提取物的抗氧化与抑菌活性研究

目的：观察蒌叶各部分提取物的抗氧化及抗菌实验效果。方法：采用滤纸片
法对6种常见细菌的生长抑制活性进行测定，用DPPH法及连苯三酚红褪色法进
行抗氧化研究。结果：蒌叶提取物对藤黄球菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄
色葡萄球菌、绿脓杆菌、佛氏痢疾杆菌均有抑杀作用；蒌叶提取物均具有抗氧化
作用。结论：蒌叶果实部分乙醇提取物具有更强的抗菌作用；蒌叶叶子部分乙醇
提取物具有较强的抗氧化活性。

标签：蒌叶；抗氧化；抑菌活性

蒌叶（PiperbetleLinn.）别名蒟酱、青蒟、芦子、大芦子、槟榔蒟、槟榔，
属胡椒科胡椒属植物［1］。蒌叶在我国古代曾是有名的栽培植物和野生药用植物，
以全株或茎、叶入药，味辛、微甘，温。全株及茎叶全年可采为药用。具有祛风
散寒，行气化痰，消肿止痒的功效。主要用于治疗风寒咳嗽，支气管哮喘，风湿
骨痛，胃寒痛，妊娠水肿；外用可治皮肤湿疹，脚癣等皮肤疾病［2］。因为蒌叶
的抗病抗虫性强，长期咀嚼蒌叶还有护齿作用。研究发现蒌叶的提取物对老鼠的
可逆性节育有一定作用［3］。蒌叶中的主要成分是生物碱、木脂素、黄酮类［4~5］。
本文采用DPPH法及连苯三酚红法对蒌叶提取物进行了抗氧化活性研究，并分别
采用蒌叶的多种提取物对多种菌株进行抑菌了实验，拟观察蒌叶体外的抗氧化及
抑菌效果，为中药蒌叶的开发和应用提供基础理论依据。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1材料与试剂蒌叶（PiperbetleLinn.）采自云南保山。标本经云南大学
生物系马绍宾教授鉴定后保存于云南民族大学生物技术实验室。DPPH（1，
1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl二苯代苦味肼基自由基），日本东京化成株式会社生
产；连苯三酚红，LEADMAN公司生产；没食子酸，实验室自制；其它试剂均
为国产分析纯。

1.1.2供试菌种藤黄球菌（Micrococcusluteus）、大肠杆菌（Escherichiacoli）、
普通变形杆菌（Proteusmirabilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、绿
脓杆菌（Pseudomonasaeraginosa）、佛氏痢疾杆菌（Valsalvadysenterybacillus）
购置于云南大学微生物实验室以牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养［6］备用。

1.2仪器与设备（只标注主要的）旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；循
环水式真空水泵，河南巩义市英峪华仪器厂；7200型分光光度计，上海精密科
学仪器有限公司；恒温箱，上海实验仪器厂；手提式压力蒸汽灭菌锅，广州市化
南医疗器械厂；超净工作台，苏州净化集团安泰设备公司。

1.3方法

1.3.1蒌叶提取物浸膏的制备称取晒干切碎的蒌叶茎、叶和果实各100g，
分别用95%的酒精和70%的丙酮直接回流3h，重复4次，馏分用旋转蒸发器减
压浓缩，蒸干溶剂，得膏状提取物，称重。置于小瓶子中保存备用。

1.3.2蒌叶提取物的抑菌活性研究取蒌叶的各种提取物0.1g，各加入1mL
95%的乙醇使其完全溶解，得浓度为10%的溶液，再依次稀释为5%、2.5%的浓
度梯度。灭菌后放置备用。利用滤纸片琼脂扩散法［7~8］对蒌叶提取物进行抑
菌活性测定。

1.3.3蒌叶提取物的抗氧化活性研究取蒌叶各种提取物按质量浓度均为
1.05g/L配制成抗氧化剂溶液。按以下方法进行抗氧化活性研究。

1.3.3.1DPPH自由基捕获分光光度法［9］往10mL比色管中依次加入4mL
pH6.88标准磷酸盐缓冲溶液，4mL0.1777mmol/LDPPH溶液，混匀，再加入
一定量抗氧剂溶液，蒸馏水补充体积至10mL刻度，充分混匀，10min后在520
nm处测量吸光度。对DPPH自由基的清除率的计算

KP（%）=［1-（Ai-Aj）/Ac］×100

式中：Ai=加抗氧剂反应后DPPH溶液吸光度；Aj=不加DPPH，只加

抗氧剂及水的溶液的吸光度；Ac=未加抗氧剂，只加DPPH及水的溶液的吸光
度。

1.3.3.2连苯三酚红褪色光度法［9］往10mL具塞比色管中，依次加入2mL
pH9.1的Na2CO3—NaHCO3缓冲溶液，0.7mL0.0038mol/LEDTA-Fe2

+溶液，3.5mL0.0001mol/L连苯三酚红溶液，0.7mL体积分数0.6%H2O2
溶液，蒸馏水补充至刻度后在25℃保温反应30min（上面每加一次均需摇匀），
测544nm处的吸光度。设不加H2O2时的吸光度为A0，加入H2O2后的吸

光度为Ab，则羟自由基产生量可用ΔA=A0-Ab来表征。在体系中加

H2O2之前加入一定量的抗氧剂样品，测定其吸光度As。则抗羟自由基氧化率
S的计算

SP（%）=（A