一种尿液中.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113188863A(43)申请公布日2021.07.30(21)申请号202110433422.8G01N23/00(2006.01)(22)申请日2021.04.21(71)申请人国家卫生健康委职业安全卫生研究中心（国家卫生健康委煤炭工业职业医学研究中心）地址102308北京市门头沟区石龙北路27号(72)发明人陈飞熊强闫琳琳曹静李玉文梁婧张震张建芳樊晶光(74)专利代理机构北京思海天达知识产权代理有限公司11203代理人张立改(51)Int.Cl.G01N1/28(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图2页(54)发明名称一种尿液中14C的定量检测方法(57)摘要一种尿液中14C的定量检测方法，属于放射卫生技术领域。包括如下步骤：(1)量取一定体积的尿样，加入过硫酸钾并加热、搅拌，将尿样中的有机碳和无机碳转化为二氧化碳，生成的二氧化碳通过载气吹扫后用碱液吸收。(2)将吸收液用氯化铵调节pH，加入饱和氯化钙溶液生成碳酸钙沉淀，静置，抽滤，干燥。(3)将制成的碳酸钙沉淀粉末用研钵研磨成粉末，称取适量粉末，用液体闪烁计数仪进行14C的活度测量。本专利中提供的方法准确度高，回收率高，检测结果稳定，能够满足尿液样品中14C活度浓度的分析。CN113188863ACN113188863A权利要求书1/2页1.一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，所述方法依次包括如下步骤：(1)搭建反应装置，反应装置由三口烧瓶，三口烧瓶配有冷凝管，同时采用两级串联的碱液吸收瓶作为气体吸收装置；量取一定体积V的尿样，置于圆底烧瓶中，加入过硫酸钾；(2)碳氧化为CO2：将步骤(1)装置中通入氮气，加热并磁力搅拌，冷凝回流；将尿样中的有机碳转化为二氧化碳，生成的二氧化碳通过载气吹扫后用串联的两级碱液吸收；(3)制备碳酸钙沉淀：将步骤(2)得到的两级碱液吸收液合并用氯化铵调节pH，加入饱和氯化钙溶液直至完全生成碳酸钙沉淀，静置，抽滤，干燥，制成的碳酸钙沉淀粉末用研钵研磨成粉末，称重为M2；(4)液闪样品制备：称取适量步骤(3)得到的碳酸钙粉末M1，加入超纯水和闪烁液，制成待测样品；(5)测量：将步骤(4)中的待测样品避光后用液体闪烁计数仪进行测量。2.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(5)采用液体闪烁计数仪进行液闪测量时应打开PAC(脉冲幅度甄别)。3.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述样品为尿样体积V为80～120mL，加入过硫酸钾的量为10g；其中步骤(2)中，所述碱液为1mol/L氢氧化钠，每一级所需量为50mL，需要两个吸收管串联。4.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(2)中，加热至95℃开始计时，恒温反应时间为60min，同时打开磁力搅拌。5.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，其中步骤(2)中，所述载气为氮气，并控制流速为0.5L/min。6.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(3)中，调节pH为10.0～10.5；抽滤至近干时需加入乙醇溶液使沉淀快速干燥，然后将其放入红外烤箱，烘烤3次，每次5min。7.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(4)中，称取M2＝1g碳酸钙粉末，对应加入液闪计数瓶中，并加入6mL超纯水；闪烁液加入12mL，加热并充分摇匀；所述闪烁液为INSET‑GEL。8.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(5)中，需避光24小时后开始检测，测量时间300min。9.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，步骤(5)，进一步将碳酸钙标准品、本底样品以及待测样品放入液体闪烁计数仪进行测量得到计数率，以此计算液体闪烁计数仪效率E和尿样中14C比活度A，公式如下：式中：E为液体闪烁计数仪的计数效率，cpm；2CN113188863A权利要求书2/2页14NS为已知碳酸钙标准品的计数率，cpm；已知碳酸钙标准品为已知活度的放射性C碳酸钙粉末；14N0为本底值的计数率，cpm；本底值计数率指的是无放射性C碳酸钙粉末的计数率；D为已知碳酸钙标准品的活度，Bq；A为尿样中14C的活度浓度，Bq/L；N1为被检尿样产生的碳酸钙的计数率，cpm；M1为称取用于液体闪烁计数仪检测的尿样产生的碳酸钙粉末的质量，g；M2为被检尿样体积V生成的碳酸钙总重量，g；V为被检尿样总体积，L；Y为样品回收率，％。10.按照权利要求1所述的一种尿液中14C的定量检测方法，其特征在于，样品回收率Y的为测定值，测定