共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113528119A(43)申请公布日2021.10.22(21)申请号202110795713.1(22)申请日2021.07.14(71)申请人齐鲁工业大学地址250353山东省济南市长清区大学路3501号(72)发明人张献付雯潘利王秋波卢倩姚金水马瑞健(74)专利代理机构济南圣达知识产权代理有限公司37221代理人孙维傲(51)Int.Cl.C09K11/02(2006.01)C09K11/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书2页说明书6页附图3页(54)发明名称共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针及其制备方法和应用。具有较宽紫外吸收的FeOOH材料，可以通过FRET作用使CPNsPBOC‑COOH产生荧光猝灭。在BChE和乙酰胆碱酯酶(ATCh)存在下，两者产生的酶解产物(一种硫代胆碱)能有效地降解FeOOH，使CPNsPBOC‑COOH的荧光恢复。经试验证明，CPNsPBOC‑COOH@FeOOH体系具有理想地荧光猝灭效率。FeOOH的大表面积和薄层结构为硫代胆碱的反应提供了丰富的接触面积，最终会提高探针的灵敏度和选择性，检测范围较宽，为0.02～2.6μg/mL，LOD较低，为3.5ng/mL。CN113528119ACN113528119A权利要求书1/2页1.一种共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针，其特征在于，包括羧基化的共轭聚合物纳米粒子CPNsPBOC‑COOH和过渡金属羟基氧化物。2.根据权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针，其特征在于，所述过渡金属羟基氧化物选自CoOOH、NiOOH和FeOOH中的至少一种。3.权利要求1或2所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针的制备方法，其特征在于，将CPNsPBOC‑COOH与过渡金属羟基氧化物在室温下混合，避光反应，即得；优选地，所述PBOC结构式为所述n为大于0的自然数，优选为大于45的自然数，进一步优选为50，所述PBOC结构单元分子量为689。4.权利要求1或2所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针的制备方法，其特征在于，所述CPNsPBOC‑COOH与过渡金属羟基氧化物的质量比为1:0.1‑130；优选地，所述避光反应时间为10‑20min，优选为15min。5.权利要求1或2所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针的制备方法，其特征在于，所述羧基化的共轭聚合物纳米粒子CPNsPBOC‑COOH的制备方法包括：将共轭聚合物PBOC与PSMA混合、超声形成均相溶液，加入超纯水超声、蒸发、浓缩、过滤获得上清液，即得。6.权利要求1或2所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针的制备方法，其特征在于，所述共轭聚合物PBOC与PSMA的质量比为5:1‑3，优选为5:2；优选地，共轭聚合物PBOC浓度为0.5‑2mg/mL，优选为1mg/mL。7.权利要求1或2所述的共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针的制备方法，其特征在于，共轭聚合物PBOC与PSMA混合物所用溶剂为四氢呋喃；优选地，超纯水与均相溶液体积比为1:1‑2，优选为1:2；优选地，均相溶液和加入超纯水超声时间分别为10min。8.一种丁酰胆碱酶检测方法，其特征在于，包括：将CPNsPBOC‑COOH和过渡金属羟基氧化物在室温下孵育处理；再加入丁酰胆碱酶和乙酰胆碱酯酶继续孵育；对孵育处理后的溶液进行荧光定量检测。9.根据权利要求8所述的丁酰胆碱酶检测方法，其特征在于，丁酰胆碱酶与CPNsPBOC‑COOH质量比为0.5‑3:1，优选为2:1；优选地，所述荧光定量检测具体条件为：荧光光谱测定范围为440～700nm，激发波长为430nm，激发/发射狭缝设置为10nm；优选地，所述孵育温度为37℃。2CN113528119A权利要求书2/2页10.权利要求1或2任一项所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针在检测丁酰胆碱酶中的应用。3CN113528119A说明书1/6页共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种共轭聚合物纳米粒子复合荧光探针及其制备方法和应用。背景技术[0002]公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。[0003]丁酰胆碱酶(BChE)又拟称胆碱酯酶、假性胆碱酯酶和血清胆碱酯酶，是由肝脏合成的一种非特异性酯酶，能水解许多胆碱类生物分子。BChE是由肝脏细胞合成分泌进入血液，主要分布在肝脏、血清和淋巴液中，在血浆中的含量更高。BChE水解丁酰