一种鸭精液冷冻保存稀释液.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113812396A(43)申请公布日2021.12.21(21)申请号202111144764.4(22)申请日2021.09.28(71)申请人广东海洋大学地址524088广东省湛江市麻章区海大路1号(72)发明人照那木拉李迎春苏瑛刘渊博陈进军陈志宝康丹菊(74)专利代理机构广州智斧知识产权代理事务所(普通合伙)44649代理人朱双(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图4页(54)发明名称一种鸭精液冷冻保存稀释液(57)摘要本发明公开了一种鸭精液冷冻保存稀释液，包括不含甘油的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A和含甘油的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B，每100mLTris‑卵黄冷冻保存稀释液B中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10‑25g、甘油1.5‑12mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。本发明的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液用于雷州黑鸭或其他品种鸭精子冷冻保存能大大提升保存的鸭精液品质，配制及操作简单易行，能有效的提高冻解精子活力，为雷州黑鸭乃至禽类精液冷冻保存、种质资源保存和利用等领域研究提供技术支撑。CN113812396ACN113812396A权利要求书1/1页1.一种鸭精液冷冻保存稀释液，其特征在于，包括Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A和Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B，所述的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A，每100mL中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10‑25g和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水；所述的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B，每100mL中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄10‑25g、甘油1.5‑12mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。2.根据权利要求1所述的鸭精液冷冻保存稀释液，其特征在于，所述的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A，每100mL中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄15‑20g和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。3.根据权利要求1所述的鸭精液冷冻保存稀释液，其特征在于，所述的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B，每100mL中含有：Tris‑碱0.85g、乳糖0.35g、柠檬酸三钠二水0.5g、肌醇0.02g、鸭卵黄15‑20g、甘油3‑6mL和2mg/mL的硫酸阿米卡星200μL，余量为水。4.一种鸭精液冷冻保存方法，其特征在于，包括如下步骤：a.采集鸭精液，将品质检查合格的精液预热至35‑37℃备用；b.于35‑37℃条件下，用Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A将精液稀释4倍后装入离心管，将离心管放入35℃水中然后置于5℃条件下缓慢降温平衡2‑3h；平衡到5℃后用Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B分两次稀释：第一次将精液与Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B按体积比2:1稀释，然后平衡5‑10min；第二次将精液与Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B按体积比2:1稀释，然后再平衡5‑10min；然后将稀释液分装至冷冻细管并封口，液氮熏蒸10‑15min，然后放入液氮中保存。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的鸭为雷州黑鸭、白鸭或麻鸭。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的离心管为15mL规格的离心管。7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的冷冻细管为0.25mL规格的冷冻细管。8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的Tris‑卵黄冷冻保存稀释液A和Tris‑卵黄冷冻保存稀释液B使用前保持在5℃。2CN113812396A说明书1/7页一种鸭精液冷冻保存稀释液技术领域[0001]本发明属于动物繁殖技术领域，具体涉及一种鸭精液冷冻保存稀释液。背景技术[0002]家禽的精液保存是人工授精技术中的关键环节,该技术水平的高低将直接影响生产过程中的经济效益。精液冷冻保存可以不受限于时间和空间，提高优良种公禽的利用率，促进品种改良等优点。利用冷冻保存技术,可以将精子、卵子、胚胎等置于‑196℃的环境中,抑制其新陈代谢,从而进行保存,在需要时再解冻利用。目前因禽类冷冻精液活力低导致受精率极不稳定,只有少数国家建立了禽类精子冷冻库。国内外对家禽精液冷冻保存研究主要集中在鸡上,鸭的研究较少,相关报道也较少。鸭精液通过冷冻可长期保存,这样对精液的使用、选种、杂交改良,打破了精液使用的时空限制,使优秀基因迅速传播。雷州黑鸭是广泛分布于雷州半岛一带，属于黑羽蛋肉兼用型地方鸭，是具有肉质鲜美