副猪嗜血杆菌的分离与鉴定.doc

副猪嗜血杆菌的分离与鉴定
李晓华*杨小燕郑新添戴爱玲李改娜
（福建龙岩学院生命科学学院
预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室
福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心
福建龙岩364000）
摘要：从福建省龙岩市l例临床症状、病理剖检变化疑似副猪嗜血杆菌病的患病猪的关节液中分离到1株革兰氏染色阴性可疑菌株，经卫星现象、生化鉴定等实验室诊断，进一步以副猪嗜血杆菌的16SrRNA基因设计特异性引物进行PCR鉴定，确定该分离菌为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明，分离株对环丙沙星、氨苄西林、阿米卡星、庆大霉素、氟苯尼考、磺胺类等药物敏感；对阿莫西林、诺氟沙星有抵抗力。

关键词：副嗜血杆菌；分离鉴定；药敏试验
IsolationandIdentificationofHaemophilusparasuis
Xiaohua-Lixiaoyan-Yangxintian-Zhengailing-Daigaina-Li
1.CollegeofLifeSciences,LongyanUniversity,Longyan,FujianProvince364000,PRChina
2.KeyLaboratoryofPreventiveVeterinaryMedicineandBiotechnology,LongyanUniversity,Longyan,FujianProvince364000,PRChina
3.EngineeringResearchCenterforthePreventionandControlofZoonosis，FujianProvince364000,PRChina
Abstract：AcoveyofswinewhoseclinicalsymptomslookedlikeHaemophilusparasuisdiseasewerecheckedbylabtechnologies．Researchasbacteriaobservation，culturalcharacteristicsandbiochemicalpropertiesofHaemophilusparasuisweredone．Accordingtothesequenceofbacteriuml6SrRNA，specialprimersweredesignedforPCRamplification.TheresultsshowedthatthestrainwastentativelyidentifiedasHaemophilusparasuis．Thedrugsensitivetestsshowed：thestrainwassensitiveto环丙沙星、氨苄西林、阿米卡星、庆大霉素、氟苯尼考、磺胺类等药物敏感；对阿莫西林、诺氟沙星．
Keywords：Haemophilusparasuis；isolationandidentification;drugsensitivetest

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李晓华(1968、8—),女,福建长汀人，高级实验师，主要从事实验室管理及动物疫病防控研究。
基金项目：福建省科技厅创新平台建设项目（FJ200812）
福建省科技计划项目（2008N2005）*通讯作者
猪副嗜血杆菌病(Haemophilusparasuis，Hps)又称“革拉瑟氏病”(Gllisser’sDisease)，是由副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)引起的一种以多发性浆膜炎和关节炎为特征的疾病[1]。该菌寄生在健康猪鼻腔等上呼吸道内，主要通过空气直接接触传播，其他传播途径如消化道等亦可传播[2]。主要影响2～4周龄的猪，感染高峰为4～6周龄的猪[3]，发病率在10%～15%，严重时病死率可达50%。随着规模化养殖和养殖密度的增加，近年来，该病的发病率和死亡率均呈上升趋势，成为危害规模化养猪场最严重的细菌性疾病之一，给养猪业造成巨大的经济损失。2008年10月，福建龙岩某规模化猪场5—8周龄的保育猪发病严重,临床症状主要表现为精神沉郁、食欲减少，体温升高40-41℃,流鼻涕,腹式呼吸,被毛粗乱，消瘦、关节肿大，病猪不愿站立，跛行，病程达4个多月，发病率40%。剖检病变主要表现为体内有水肿、充血、血液不凝,呈暗红色,全身脏器多数有出血斑点,膀胱粘膜和肾皮质点状出血,喉、会咽斑状出血,胸腔内有大量淡红色液体、纤维性渗出物;心包有大量纤维素性渗出物，似菜花状；肺脏呈纤维素性胸膜肺炎,腹腔内有大量透明黄褐色渗出液；关节腔内充满黄色浑浊液。怀疑猪副嗜血杆菌感染而致，随机采集病料进行病原分离鉴定及药敏试验。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1病料
采自福建省龙岩市某猪场疑似Hps发