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第17卷第12期China中Jo国urn现al代of医M学od杂em志MedicineVo1.17No.12 2007年6月Jul1.2咖 文章编号:1005—8982(2007)12—1434-04 ·论著· 用镭射激光捕获技术研究LEC鼠P53 基因突变和肝癌发生的关系木 程大也.一,梁彬.一,解芳s,梁红,李丰 (1.中国医科大学细胞生物学实验室,辽宁沈阳110001;2.中国医科大学附属一院 输血科,辽宁沈阳110001;3.中国医科大学高等职业技术学院检验教研室, 辽宁沈阳1l0001;4.中国医科大学肿瘤研究所,辽宁沈阳1l0001) 摘要:目的研究P53基因突变与原发性肝癌发生发展的关系。方法利用LEC鼠(1ongevancinna— mort)作为肝癌的动物模型。选取15周,37周,101周的LEC鼠15,14和10只,正常对照SD大鼠15只,取出 肝脏组织进行切片。切片一部份用于GST—P免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色,另一部份利用镭射 激光捕获技术(1asercapturemicrodissection,LCM)定位切割,进行P53基因外显子5,6/7,8突变的分析。结 果37周龄LEC鼠和101周龄LEC鼠GST—P阳性率高于对照组(P<0.005),15周龄LEC鼠GST—P阳性 率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。P53基因在GST-P表达阳性肝炎组有3例突变(3/11), GST—P表达阳性肝癌组有10例发生突变(10/15),肝癌组显著高于肝炎组(P<0.05)。结论P53的突变发 生在肝癌形成的早期阶段,随着发展过程,突变率明显增高。GST-P虽然特异性不强,但是不失为一种灵敏的 判断肝损伤的指标。 关键词:P53;镭射激光捕获技术;LEC鼠;突变 中图分类号:K735.7文献标识码:A Useoflasercapturerm~cro)dissection(l,LI⋯SM)JtostudOy therelationshipbetweenP53mutationofLEC ratsandhepat0carcin0genesjs CHENGDa—ye,LIANGBin,XIEFangz.LIANGHong4,LIFeng (1.DepartmentofCeUBiology,ChinaMedicalUniversity,LiaoningShenyang,110001,P-R.China,. 2.DepartmentofTransfusion,FirstAffiliatedHospital,ChinaMedicalUniversity,Shenyang, Liaoning110001。P.R.China;3AdvancedTechnicalCollegeofChinaMedicalUniversity, Shenyang,Liaoning11DDDJ,R.China;TumorResearchInstitute,China MedicalUniversity,Shenyang,Liaoning11DDDJ,尺.C口J Abstract:【Objective】ToinvestigatetherelationshipofP53mutationandprimaryhepatocarcinogenesis. 【Methods】UsetheLECratsasanimalmodel,choose1515weeksLECrata,1437weeksLECratsand10101 weeksLECratsasexperimentgroup,15SDratsascontrol,tookoutliverandsectioned.Somesectionswereused forimmunohistochemicalstaining,theotherswereusedforanalysisofP53mutationbyLCM.【Results】Compared withthecontro~,GST—Pexpressionratiosbetween37weeksand101weeksLECratswithout15weeksLECrats wereallhigherthanthecontrols(P《O.OO5).Ratioof1'53mutationinbepatomagroupwithGsT—Ppositive(10/15) Washigherthanhepatitisgroup(3/11)<o.05).【Conclusion】P53mutationl'anthroughtheinitiativeandlate 收稿日期:2006-12—25 基金项目