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多管发酵法测定水中大肠菌群多管发酵法测定水中大肠菌群一、实验目的发酵法:又称多管发酵法或三步发酵法 1)初发酵(推测试验): 将不同稀释度的水样,分别接种于含有乳糖等糖类的培养液中(3倍或1倍乳糖液),经37ºC培养24h,观察产酸产气情况,培养基内加有溴甲酚紫作为PH指示剂,细菌产酸后,培养基即由原来的紫色变为黄色,以初步判断是否有大肠菌群存在。2)平皿分离(证实试验)3)复发酵试验(完成实验)三、实验材料四、操作步骤(2)平板分离 将经24h和48h培养后产酸产气的发酵管,分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上,再于37℃培养18~24h,将符合下列特征的菌落进行染色镜检。 深紫黑色,有金属光泽; 紫黑色,不带或略带金属光泽; 淡紫红色,中心颜色较深。(3)复发酵试验 将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。并根据初发酵管试验的阳性管查表,即得大肠菌群数。图1多管发酵测定水中大肠菌群的操作步骤和结果解释五、思考题