第十六章 临床电泳分析仪器2012.ppt

第十六章临床电泳分析仪器最常见的电泳仪该仪器开展的主要项目有:
1、血清蛋白电泳
2、CK同功酶
3、CK同功酶亚型
4、LDH同功酶
5、AKP同功酶
6、r-GT同功酶
7、脂蛋白电泳
8、血红蛋白电泳
9、胆固醇电泳
10、结合珠蛋白电泳
11、免疫固定电泳
12、脑脊液蛋白电泳
13、尿液蛋白电泳蛋白电泳氨基黑染色胃肠道的蛋白丢失
各区带含量均减少，在各种胃肠道功能紊乱时，Alb丢失的同时也伴有球蛋白的丢失。常继发于狭窄性心包炎，先天性肠道林巴管扩张，肠道炎症等。蛋白电泳丽春红染色急性烧伤病人的电泳图谱急性肝脏疾病电泳技术用途-分离、鉴定、纯化电泳仪的定义

电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术（electrophoresis-technique）。
可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪（electrophoresister)；蛋白质电泳动画.swf若溶液里一电量为q的带电粒子，在场强为E的电场中以速度v移动，则它所受到的电场力F1应为：
F1=QE
根据斯托克司定律，在液体中泳动的球状粒子所受到的阻力F2，为：
F2=6πηRV
式中η为介质的粘度系数，R为粒子半径。
当二力平衡，即F1=F2时，粒子作匀速运动。且有
V=QE/6πrη
从上式可以看出移动速度不仅与本身性质有关，还受到外界因素的影响影响电泳的因素一般来说，不同成分的物质，其颗粒本身所带的电量以及颗粒的半径(或摩擦系数)都是不同的，所以它们的迁移率各不相同。利用这一原理即可把物质中各种不同的成分分离开来。例如，血清蛋白中含有各种蛋白质(清蛋白、α1,α2,β,γ球蛋白等)，
电泳分析技术的分类3、按支持物的物理性状不同4、按支持物的装置形式不同：电泳分析仪可分为两大类:
临床实验室常规类,如全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪;
科研为主兼做临床样本类,如双向电泳及双向电泳,液相色谱--质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳--质谱联用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。从目前临床
实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能：
1.全自动，必须达到人员离机作业，由点样到出报告没有人工动作。
2.速度快，所有项目应在60min内完成，同时具备急诊项目，如CK、LD等同工酶及亚型项目。
3.项目全，除了血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、CK、LD同工酶等传统项目外，必须还能完成尿蛋白、脑脊液蛋白、免疫固定(单克隆抗体)，碱性磷酸酶(ALP)和s—谷氨酰转肽酶(GGT)同工酶、胆固醇(高密度、极低密度／低密度脂蛋白)、脂蛋白(a)等最新检验项目。
4.灵敏度高，必须采用敏感度高的电泳片，如琼脂糖凝胶系统，才能得到准确度高、分辨率高的电泳结果
第二节常用电泳技术和电泳方法（二）醋酸纤维素薄膜电泳
电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特点是分离速度快、
电泳时间短、样品
用量少。因此特别
适合于病理情况下
微量异常蛋白的检测。

醋酸纤维素薄膜电泳分离血清清蛋白（三）凝胶电泳
由区带电泳中派生出一种用凝胶物质作支持物进行电泳的方式，被称为凝胶电泳。普通的凝胶电泳在板上进行，以凝胶作为介质。电泳中常用的凝胶为葡聚糖、交联聚丙烯酰胺和琼脂糖。
它具有机械强度好、
弹性大、透明、化学稳定性高、
无电渗作用、设备简单、
样品量小(1～100μg）、
分辨率高等优点。这种介质
具有分子筛的作用
琼脂糖电泳检测聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用
聚丙烯酰胺具有许多优点:
如具有化学惰性；不与试样或其他化学成分起反应；在电泳过程中没有电渗作用和吸附作用；
弹性强，机械强度高；便于操作；透明，便于肉眼观察和用仪器测定；重复性好等。
因此聚丙烯酰胺凝胶电泳目前得到广泛应用，如用于蛋白质、核酸等不同大小分子物质的分离和分析。也可测定蛋白质亚基的摩尔质量。可直接应用于临床医学检验中，如测定脑脊液、血、尿、痰和其他体液中的痕量成分。目前多用于离血清蛋白、病毒、酶蛋白等。还可用于分离痕量的蛋白质，尿蛋白电泳及图谱（四）等电聚焦电泳
1．等电聚焦电泳过程一种利用有pH值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。（五）等速电泳采用两种不同浓度的电解质组成，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，后者则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解
质之间的空隙中移动，
实现分离。

（六）双向凝胶电泳（二维电泳）
第一向采用等电聚焦根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的