胆红素的提取与精制.doc

胆红素的提取精制与应用
摘要：胆红索是制药工业的贵重原料，可人工工合成牛黄，合成牛黄的胆红索要求质量较高，因此探索胆红素的提取方法，具有重要的科学价值和经济利益。改进备胆红索钙盐、酸化、精制等阶段，使胆红索产率和纯度都有明显提高。
关键词：胆红素、精制、探索、临床应用
正文：
一、概述
胆红素是人造牛黄的贵重原料，价格昂贵曾达25万元/kg，现在市场价5～6万元/kg，天然牛黄中的胆红素的含量高达50%～60%。天然牛黄中的胆红素钙盐是胆汁生石的重要原因。据北大吴瑾光教授的研究发现人胆石中的胆红素是和糖蛋白、多糖结合存在的；有少量的胆红素用强酸、强碱处理也不被破坏，游离胆红素在血中浓度过高显示毒性结合胆红素是无毒的。据药理实验证明，游离胆红素对乙型脑炎病毒的灭活率抑制指数是去氧胆酸和胆酸的1.0～1.5倍。据日本岗奇公彦报告，胆红素被氧化成胆绿素，成为一种有效的肝脏治疗药，他在不破坏肝组织的情况。有增殖新细胞的作用，可用于血清肝炎、肝硬变的治疗。胆红素对W256瘤有较好的抑制作用。另外，胆红索还有解热、降压、促进红血球新生等作用。我国对胆红素的需求量很大，人造牛黄已超过100t因此，胆红素提纯方法的探索有重要经济价值。
胆红素的研制开始于1864年，staedeler首先从胆石中分离了胆红素。1955年我国天津育发制药厂郭巩等人从牛胆汁中提取出胆红素；1960年武汉肉联厂开始用钙盐法从猪胆汁中提取胆红素。20世纪60年代末北京同仁堂中药提炼厂郑谷栋教授对提炼方法进行了改进；1988年先后有人提出“快速提取胆红素新技术”，“自提胆红素技术”等等。胆红素的提取归纳起来主要有两条途径：（1）先用乙醚、乙醇提取后的胆汁剩余物。再用三氯甲烷提取胆红素；（2）先制备胆红素钙盐，盐酸酸化，三氯甲烷提取。
第（1）种途径直接用氯仿提取，收得率低，只能达到0.0164～0.0168。因为胆汁中的胆红素是种极易溶于水的胆红素结合物——结合胆红素，所以直接氯仿提取不尽合理第（2）种途径为胆红素钙盐法，其收得率可增加1～2倍，但生产周期长，相应成本提高。

二、胆红素提取方法的探索
我们对第（2）种方法进行了反复探索，并作了一些改进，使胆红素的产率和质量明显提高。
1、制备胆红素钙盐
取新鲜胆汁，80目过滤，加入4倍澄清石灰水，充分搅拌均匀，然后在搅拌下逐渐加温，温度升到
50°C，停止搅拌，55t到60°C捞去白沫，65℃停止捞，继续升温至95℃，捞取胆红素钙盐(拮红色)。这和传统方法直接加热至沸腾捞取胆红素钙盐有明显不同。
石灰水的制备1份生石灰和3O份清水，搅拌均匀，密闭保存24h以上。
（2）石灰水的用量取胆汁4～4.5倍的澄清饱和石灰水为宜。若石灰水量不足，胆红素钙盐不呈红色，若胆红素钙盐颜色很淡，说明钙盐浓度很低，或胆汁已变质。
（3）制备温度升温要缓慢，搅拌必须在55℃前停止，若继续搅拌钙盐损失加大，温度不能至沸，100°C时上下翻滚，使钙盐和胆汁酸混合机会增多。
2、胆红素的抽提酸化
常规用盐酸酸化，易结成十分牯稠的团块，使胆汁酸将胆红素裹住致使后序提取工作难度加大。且天然胆红素Ixa在浓盐酸中发生异构，形成23的胆红素Ⅱa和29的胆红素xⅡa，若改用醋酸只能形成3的胆红素Ⅱa和4的胆红素xⅡa。此外，醋酸对氧化剂稳定，井可溶解胆汁，使团块分散，易提取。
3、回收精制
（1）蒸馏水温度严格控制在80到85℃，超过85℃部分胆红素热解，回收率大大下降。
（2）乙醇的加入时间至关重要，传统方法不注意此。乙醇加入过早，使乙醇和氯仿混溶，胆红素不易结晶；乙醇加入慢丁，胆红素部分热解。根据实践，无水乙醇的加入时机要掌握3个要领：观色，呈桔红色时；观气，基本无翻滚气泡；闻味，基本无氯仿味。

三、生产工艺
1、工艺路线
猪胆（破碎）→胆汁（煮沸制钙盐）→胆钙盐（<20°C条件下酸化）→酸化物（<20°C条件下二次酸化）→沉淀（热水洗）→沉淀（氯仿提取）→提取液（蒸馏）→胆红素（乙醇洗涤）→成品胆红素
2、工艺过程
（1）钙盐的制备。取新鲜胆汁1kg，加入4～4.5倍澄清饱和石灰水，搅拌均匀，加热至95℃。捞取液面橙红色胆钙盐,井趁热压干。
（2）酸化于钙盐中加入适量蒸馏水，捣成糊状，过60目筛，加入1%的NaHSO3。在搅拌下加入HAc调pH一1～2，静置30s，过滤得沉淀。
（3）乙醇处理。沉淀中加入适量95%的乙醇，捣成棚状，再加入300~400mL95%乙醇和0.5%的NaHSO3，搅拌均匀，使pH=3～3.5。静置，虹吸祛除乙醇(可回收)，下层加入适量40～5O℃温水，静置分层，虹吸祛除下层废水。
（4）提取于收集物中加入氯仿400mL，回流提取或不断搅拌抽提，然后在分液器分层，收集下层氯仿层，于常压下蒸发出氯仿(水搭温度小于85℃)，于