干细胞研究进展讲稿.ppt

1981年Evans等成功地建立了小鼠的ESC系；
1995年Thompson等建立了第一株灵长类动物的ESC系；
1998年11月，美国威斯康星大学的科学家在美国《科学》杂志报告说，他们已成功地使人类胚胎干细胞在体外生长和增殖；
1999年12月，干细胞研究进展被《科学》杂志评选为该年度世界十大科学进展之首;
1999年12月，美国科学家在《美国科学院院刊》报告说，小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化”为血液细胞。随后，世界各国的科学家相继证实，成体干细胞，包括人类的成体干细胞具有可塑性;
2001年末,干细胞研究又被其列为六大热门科技领域之首;
2001年4月，美国科学家发现，从病人臀部和大腿处抽取的脂肪中，含有大量类似干细胞的细胞，这些细胞可以发育成健康的软骨和肌肉等。
2006年两项研究成果标志着干细胞技术正从一种概念，转变成能够看得见的事实：
美国科学家利用胚胎干细胞所衍生的运动神经元让瘫痪的老鼠恢复了行走能力；
英国科学家从胚胎干细胞中培育出来的精子，并使之与卵细胞结合，生育出幼鼠。
2010年1月韩国《朝鲜日报》报道，韩国建国大学兽医学院教授利用人类脐带血干细胞成功治愈了脊髓受伤导致两条后腿瘫痪的狗。
分离和体外培养各种来源的干细胞的技术不断成熟,更是引发了新一轮的干细胞研究热潮。
美国加州每年提供干细胞研究经费达3亿美元。我国的干细胞研究也很活跃，“863”计划近期将为干细胞研究提供2亿元人民币的经费。2000年日本启动“千年世纪工程”，干细胞工程为核心技术的再生医疗成为这项工程的四大重点之一，第一年度投资金额达108亿日元。到底干细胞是什么东西，为何会受到如此的关注？
干细胞是潜力无穷？还是被我们过度期待？

多能干细胞pluripotentstemcells：
a、来源：胚胎干细胞—内细胞群细胞
胚胎生殖细胞—原始生殖细胞
b、特点：可进行克隆性增殖而不发生分化，保持二
倍体核型不变；
具有多向分化的潜能，在特定条件下可诱
导分化为三个胚层来源的所有组织细胞；
失去了发育形成生物个体的能力。
c、多分化潜能性的实验证据：嵌合体实验
畸胎瘤实验
类胚体实验
单能干细胞unipotentstemcells：
成体干细胞/组织特异性干细胞
a、特征：能自我复制,有分化潜能,但只能分化为所在
组织的功能细胞。
b、存在部位：骨髓,周围血液,脑,脊髓,血管,骨骼肌,表皮,
消化管,角膜,视网膜,肝,胰等
c、可塑性：横向分化
特化细胞specializedcells：
具有特定形态结构、分子标记和功能，不能进行分化。ESC和成体干细胞的异同

干细胞是一类能够进行自我更新和具有分化潜能的细胞
（具有分裂增殖能力，干细胞本身不是处于分化途径的终端）。
干细胞通过两种方式生长
*对称分裂---形成两个相同的干细胞
*不对称分裂---由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分
配，使得一个子细胞不可逆的走向分化的终端成为
功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍
作为干细胞保留下来。

研究干细胞增殖和分化机制的最终目的是应用干细胞治疗疾病。理论上讲，干细胞可以用于许多疾病的治疗，像帕金森氏病、糖尿病、心肌梗死、肝功能衰竭等。就是干细胞的这种潜在的价值引起了各国学者的研究兴趣。

胚胎干细胞embryonicstemcells
干细胞相关技术：克隆clone
转基因技术transgenictechnology
成体干细胞：神经干细胞neuralstemcells
肺干细胞pulmonarystemcells
诱导型多能干细胞inducedpluripotentstemcell

胚胎干细胞（embryonicstemcell,ESC）是从早期胚胎的内细胞团中分离出来的一种高度未分化、具有多向分化潜能的细胞。
1981年Evans等从囊胚的内细胞群中成功分离、建立了小鼠的ESC系
1998年Thomson和Gearhart分别用胚泡内细胞团细胞和原始生殖细胞成功地建立了人的ESC系
在全球范围内掀起了ESC的研究热潮。
早期小鼠胚胎的获得：
受精后第4天上午，取出孕子宫，将输卵管端夹闭，由阴道端插入5号针头注入冲胚液，至宫腔达到一定压力，突然松开输卵管侧，即可获得发育至囊胚期的早期胚胎。选取发育良好的囊胚接种在饲养层细胞上。

小鼠早期胚胎的体外培养---饲养层：
饲养层细胞的作用：
培养的鼠胚成纤维细胞经丝裂霉素C处理后，可用作饲养层细胞。饲养层细胞经丝裂霉素C处理后，虽然失去分裂能力，但仍然保持生存活性，并为胚胎干细胞的存活、增殖和未分化状态的维持提供一些必需因子，还可去除培养环境中的毒素和代谢抑制因子。
饲养层细胞的处理方法如下